柴胡皂苷A、黃芩素及其配伍對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2和SMMC-7721體外作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討柴胡皂苷 A、黃芩素及其配伍對(duì)肝癌細(xì)胞抗增殖、促凋亡的作用機(jī)制。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)主要通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)，將柴胡皂苷 A、黃芩素及其配伍分別作用于人肝癌 HepG2和SMMC-7721細(xì)胞，采用 MTT法測(cè)定柴胡皂苷 A、黃芩素及其配伍對(duì) HepG2細(xì)胞和SMMC-7721細(xì)胞增殖的影響；選用流式細(xì)胞儀 Annexin V-FITC/PI雙標(biāo)法檢測(cè)給藥后 HepG2和SMMC-7721細(xì)胞凋亡率；并選用流式細(xì)胞儀 Prop

2、idium Iodide(PI)單標(biāo)法檢測(cè)對(duì) HepG2和SMMC-7721細(xì)胞周期過(guò)程的影響；采用免疫組化法檢測(cè)HepG2和SMMC-7721細(xì)胞凋亡的相關(guān)基因 caspase-3和cox-2蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：體外細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)（MTT）中發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷A、黃芩素及其配伍對(duì)HepG2和SMMC-7721細(xì)胞的增殖具有明顯的抑制作用，同時(shí)發(fā)現(xiàn)配伍后抑制作用明顯強(qiáng)于兩藥單獨(dú)使用；流式細(xì)胞儀的測(cè)定結(jié)果顯示給藥培養(yǎng)48h后，與陰性對(duì)照

3、組比較，柴胡皂苷A、黃芩素及其配伍對(duì)HepG2和SMMC-7721細(xì)胞凋亡率明顯增高，配伍組與柴胡皂苷A組、黃芩素組相比，細(xì)胞的凋亡率顯著增大；流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示,與陰性對(duì)照組比較，柴胡皂苷A、黃芩素作用于HepG2和SMMC-7721細(xì)胞48h后均能使G0/G1期細(xì)胞數(shù)量顯著增加，S期和G2/M期細(xì)胞減少；配伍組給藥培養(yǎng)48h后，HepG2和SMMC-7721細(xì)胞的G0/G1期細(xì)胞數(shù)量均增加，S期和G2/M期細(xì)胞減少，與柴胡皂苷A、黃

4、芩素單用組比較均有顯著性差異，說(shuō)明兩藥配伍有協(xié)同抑制作用；免疫細(xì)胞化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷A、黃芩素及其配伍作用48h后，與凋亡相關(guān)基因COX-2表達(dá)下調(diào)和Caspase-3表達(dá)升高，且配伍組作用明顯強(qiáng)于柴胡皂苷A組和黃芩素組。
　　結(jié)論：柴胡皂苷 A與黃芩素對(duì)肝癌 HepG2和SMMC-7721細(xì)胞具有抑增殖、促凋亡的作用，并且兩者配伍后對(duì) HepG2和SMMC-7721細(xì)胞抑增殖、促凋亡的作用具有明顯的協(xié)同作用；柴胡皂苷 A、黃芩