柴胡皂苷A、黃芩素及其配伍對人肝癌細胞HepG2和SMMC-7721體外作用的實驗研究.pdf

1、目的：探討柴胡皂苷 A、黃芩素及其配伍對肝癌細胞抗增殖、促凋亡的作用機制。
　　方法：本實驗主要通過體外細胞培養(yǎng)，將柴胡皂苷 A、黃芩素及其配伍分別作用于人肝癌 HepG2和SMMC-7721細胞，采用 MTT法測定柴胡皂苷 A、黃芩素及其配伍對 HepG2細胞和SMMC-7721細胞增殖的影響；選用流式細胞儀 Annexin V-FITC/PI雙標法檢測給藥后 HepG2和SMMC-7721細胞凋亡率；并選用流式細胞儀 Prop

2、idium Iodide(PI)單標法檢測對 HepG2和SMMC-7721細胞周期過程的影響；采用免疫組化法檢測HepG2和SMMC-7721細胞凋亡的相關基因 caspase-3和cox-2蛋白表達水平。
　　結(jié)果：體外細胞毒實驗（MTT）中發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷A、黃芩素及其配伍對HepG2和SMMC-7721細胞的增殖具有明顯的抑制作用，同時發(fā)現(xiàn)配伍后抑制作用明顯強于兩藥單獨使用；流式細胞儀的測定結(jié)果顯示給藥培養(yǎng)48h后，與陰性對照

3、組比較，柴胡皂苷A、黃芩素及其配伍對HepG2和SMMC-7721細胞凋亡率明顯增高，配伍組與柴胡皂苷A組、黃芩素組相比，細胞的凋亡率顯著增大；流式細胞儀檢測顯示,與陰性對照組比較，柴胡皂苷A、黃芩素作用于HepG2和SMMC-7721細胞48h后均能使G0/G1期細胞數(shù)量顯著增加，S期和G2/M期細胞減少；配伍組給藥培養(yǎng)48h后，HepG2和SMMC-7721細胞的G0/G1期細胞數(shù)量均增加，S期和G2/M期細胞減少，與柴胡皂苷A、黃

4、芩素單用組比較均有顯著性差異，說明兩藥配伍有協(xié)同抑制作用；免疫細胞化學染色發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷A、黃芩素及其配伍作用48h后，與凋亡相關基因COX-2表達下調(diào)和Caspase-3表達升高，且配伍組作用明顯強于柴胡皂苷A組和黃芩素組。
　　結(jié)論：柴胡皂苷 A與黃芩素對肝癌 HepG2和SMMC-7721細胞具有抑增殖、促凋亡的作用，并且兩者配伍后對 HepG2和SMMC-7721細胞抑增殖、促凋亡的作用具有明顯的協(xié)同作用；柴胡皂苷 A、黃芩