熱療聯(lián)合化療對(duì)人肺癌A549細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文熱療聯(lián)合化療對(duì)人肺癌A549細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究姓名：王思華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：勞動(dòng)衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)指導(dǎo)教師：吳逸明陳小玉20050530鄭州大學(xué)2005屆碩士學(xué)位論文中文摘要用量、提高療效的綜合治療方法具有臨床應(yīng)用價(jià)值，與熱療聯(lián)合是一個(gè)可以值得探討的途徑。為此，本研究用人肺癌A549細(xì)胞作為研究對(duì)象，通過(guò)MTT比色法檢測(cè)熱療分別聯(lián)合TAX和NVB對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，同時(shí)采用免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)分析熱化療對(duì)肺

2、癌A549細(xì)胞凋亡的影響，初步研究熱療對(duì)TAX和NVB的體外增敏作用，以及熱藥聯(lián)合的體外抗瘤活性和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的能力，探討其作用機(jī)制，為腫瘤患者提供熱療分別與化療藥物TAX和NVB聯(lián)合應(yīng)用的理論依據(jù)，以期為開(kāi)發(fā)高效安全的臨床聯(lián)合治療方案提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。材料與方法：1細(xì)胞選用人肺癌A549細(xì)胞，藥物用紫杉醇(TAx)和蓋諾(NVB)，加熱溫度是42℃。加熱容器為培養(yǎng)箱。2MIT比色法測(cè)定單純熱療，單純化療以及熱化療聯(lián)合后細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制

3、率。3應(yīng)用Burgi修正公式對(duì)藥物聯(lián)合熱療的相互作用類(lèi)型判斷：q=(EAffEAEBEAEB)，其中EA、EB分別代表單純化療和單純熱療對(duì)細(xì)胞的抑制率，EAB為兩者聯(lián)用對(duì)細(xì)胞的抑制率。若q值大于115判為協(xié)同作用，q值介于085～115之間判為相加作用，q值小于085判為拮抗作用。4形態(tài)學(xué)觀察：以上各個(gè)藥物劑量組、熱療組和熱化療組在做MTT實(shí)驗(yàn)之前，在倒置顯微鏡下觀察培養(yǎng)板內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況及形態(tài)學(xué)改變并且照相。5流式細(xì)胞儀(FcM)檢測(cè)

4、不同處理因素細(xì)胞凋亡率的變化。6免疫組織化學(xué)方法測(cè)定各個(gè)處理組作用后凋亡相關(guān)蛋白P53，HSP70，Bcl2，cMyc等的表達(dá)情況。7實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSSl00統(tǒng)計(jì)軟件處理。MTT結(jié)果各組之蚓吸光值(OD值)的比較用方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；率的比較采用卡方檢驗(yàn)：蛋白表達(dá)率的比較用單因素方差分析。以口=005為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。結(jié)果：1對(duì)細(xì)胞增殖和抑制率的影響：(1)42。C單純加熱05h、1h后細(xì)胞增殖與對(duì)照相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(于O05)：加熱2h