淫羊藿苷逆轉(zhuǎn)耐氨甲喋呤肺癌A549細(xì)胞轉(zhuǎn)移表型的研究.pdf

1、安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文淫羊藿苷逆轉(zhuǎn)耐氨甲喋呤肺癌A549細(xì)胞轉(zhuǎn)移表型的研究姓名：吳劍鋒申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師：沈佐君20100501安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3第二部分：淫羊藿苷逆轉(zhuǎn)耐氨甲喋呤肺癌A549細(xì)胞轉(zhuǎn)移表型的研究【摘要】目的：研究中藥淫羊藿苷(icariine，ICA)作用MTX肺癌A549耐藥細(xì)胞后對(duì)細(xì)胞轉(zhuǎn)移表型的影響，初步探討ICA逆轉(zhuǎn)A549MTX耐藥細(xì)胞轉(zhuǎn)移表型的作用機(jī)制及對(duì)肺癌的治療價(jià)值。方法

2、：采用MTT法檢測(cè)ICA對(duì)A549MTX耐藥細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)；采用雙層軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)A549MTX組、A549MTXICA組細(xì)胞的克隆形成率并觀察其集落形態(tài)；細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)A549MTX組、A549MTXICA組細(xì)胞的遷移能力；Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力變化；RTPCR檢測(cè)A549MTX細(xì)胞和A549MTXICA細(xì)胞中cmyc、nm23H1基因mRNA水平的變化。結(jié)果：MTT結(jié)果顯示無毒劑量的IC

3、A與MTX聯(lián)合應(yīng)用后A549MTX細(xì)胞的IC50值為35.501.85molL，比單獨(dú)應(yīng)用MTX（同等劑量）后A549MTX細(xì)胞的IC50值（52.172.25molL）有了一定程度的下降；軟瓊脂實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)A549MTXICA組細(xì)胞克隆形成率為0.940.088，小于A549MTX組細(xì)胞的1.561.065（P0.05）；劃痕實(shí)驗(yàn)顯示72h后A549MTX組細(xì)胞的遷移能力大于A549MTXICA組細(xì)胞（P0.05）；Transwell小室