黃曲霉毒素誘導的小鼠肝癌相關蛋白的研究.pdf

1、為了深入了解黃曲霉毒素B1對小鼠肝臟蛋白的影響，本研究之前我們已經采用雙向電泳及質譜分析等方法來分析不同濃度的黃曲霉毒素B1對小鼠肝臟蛋白的影響。結果發(fā)現(xiàn)有35個蛋白質點變化差異顯著，分析其中新出現(xiàn)和明顯上調的5個蛋白質點以及缺失的和明顯下調的7個蛋白質點。其中有5個蛋白屬于引發(fā)小鼠肝臟發(fā)生病變甚至是癌變的蛋白，7個蛋白屬于參與小鼠肝臟能量與物質代謝的蛋白，這些蛋白對小鼠肝臟都有一定的影響。因而推測，黃曲霉毒素B1可能通過作用于這12個

2、蛋白質而進一步影響小鼠肝臟，使其發(fā)生病變甚至是癌變。 為排除上述實驗中可能發(fā)生的錯誤，并在轉錄水平上探索這些基因的表達情況，我們利用熒光定量PCR對黃曲霉毒素誘導后的小鼠肝臟 atp5b、idh3a和prxⅡ三個基因的mRNA量進行了相對定量。結果發(fā)現(xiàn)atp5b先增后減，idh3a有增加的趨勢，prxⅡ則近似增加，這與雙向電泳的結果一致。隨后，我們將atp5b、idh3a和prxⅡ這三個基因構建到原核表達載體pET28a上，并轉