全氟化碳對脂多糖致肺泡表面Ⅱ型上皮細(xì)胞損傷時MAPK細(xì)胞信號通路的影響.pdf

1、目的:
　　ALI/ARDS是一種常見的呼吸系統(tǒng)危重癥,發(fā)病率和死亡率較高。大量中性粒細(xì)胞浸潤過度釋放炎性介質(zhì)導(dǎo)致肺泡毛細(xì)血管膜損傷,引起通氣氧合障礙是其主要發(fā)病機理。全氟化碳( Perfluorocarbon PFC)作為液體通氣介質(zhì)被用于ALI/ARDS治療,可以顯著改善氧和及肺功能,減少中性粒細(xì)胞浸潤,但其作用機制尚未完全闡明。本研究擬觀察PFC對LPS至肺泡II型上皮細(xì)胞趨化因子MIP-1α,MIP-2,MCP-1表達(dá)與M

2、APK信號通路的變化關(guān)系,為PFC治療ALI/ARDS提供新的理論基礎(chǔ)及實驗依據(jù)。
　　方法:
　　(1)用PFC干預(yù)LPS誘導(dǎo)的A549急性肺損傷細(xì)胞模型,細(xì)胞分為空白對照組(C),LPS刺激組(LPS),LPS+PFC干預(yù)組(L+P),PFC干預(yù)組(PFC)四組,應(yīng)用熒光實時定量PCR和ELISA檢測各組細(xì)胞在干預(yù)1、2、4、6、8、12h時MIP-1α、MIP-2、MCP-1mRNA水平和蛋白水平的變化。
　　(

3、2)應(yīng)用western blot方法檢測1、2、4、6、8、12h ERK1/2, p38MAPK,JNK,ATF-2,c-jun磷酸化及總蛋白表達(dá)變化。
　　(3)將ERK1/2, JNK,p38MAPK通路抑制劑U0126, SP600125, and SB203580單獨或兩兩混合預(yù)先加入LPS干預(yù)的A549細(xì)胞中,應(yīng)用熒光實時定量PCR檢測1、6、12h MIP-2 mRNA表達(dá)的變化。
　　結(jié)果:
　　(1)