六株玫煙色擬青霉的適溫性、多菌靈抗性及對葉螨的殺卵活性評價(jià).pdf

1、玫煙色擬青霉(Paecilomycesfumosoroseus)是一種能感染多種類型害蟲的昆蟲病原真菌，在害蟲尤其是刺吸式口器害蟲的微生物防治中的應(yīng)用潛力很大。為了篩選獲得針對葉螨的生防潛力菌株，本研究在15～35℃范圍內(nèi)綜合比較研究了六株野生型玫煙色擬青霉的菌落生長、產(chǎn)孢量及所產(chǎn)孢子的活力，評價(jià)了各菌株對常用殺菌劑多菌靈的抗性，從中選出適溫范圍廣、較耐多菌靈的菌株對朱砂葉螨(Tetranychuscinnabarinus)進(jìn)行了殺卵活

2、性的生物測定，最終獲得了一株兼具多個(gè)優(yōu)良性狀的殺螨卵菌株。主要結(jié)果摘要如下。 適溫性將六株玫煙色擬青霉分別用SDAY平板在15、20、25、30和35℃下進(jìn)行培養(yǎng)，逐日測定菌落直徑，在菌落充分產(chǎn)孢時(shí)取樣計(jì)算單位面積產(chǎn)孢量，而后采用營養(yǎng)液萌發(fā)率法測定各溫度下所產(chǎn)孢子的活孢率。結(jié)果表明，玫煙色擬青霉適溫性的種內(nèi)變異較大，各溫度下不同菌株的生長速率、產(chǎn)孢量及活孢率之間均存在顯著差異，但最適溫都是25℃，適溫區(qū)為20～30℃。低溫15℃

3、下Pfr2175的菌落生長最好但產(chǎn)孢最差，其他菌株的菌落生長和產(chǎn)孢都受到不同程度影響。Pfr4205、Pfr116、Pfr6206和Pfr2175在20～30℃內(nèi)的菌落生長和產(chǎn)孢都較好。在25℃下，Pff4205、Pfr116和Pfr6206第9天的菌落直徑都在33mm以上，產(chǎn)孢量都達(dá)到107個(gè)孢子/mm2以上。菌株P(guān)ff6206和Pfr2175在35℃下仍有較高的產(chǎn)孢量和活孢率，顯然是較能適應(yīng)夏季高溫的菌株?？傮w看，15℃低溫對六株玫

4、煙色擬青霉生長、產(chǎn)孢及孢子活力的影響大于35℃高溫的影響，偏離25℃最適溫，生長和產(chǎn)孢都或多或少下降。 對多菌靈的抗性在含梯度濃度多菌靈的SDAY平板上分別測定了六株玫煙色擬青霉的菌落生長(多菌靈0～16μg/mLSDAY)和單孢菌落形成數(shù)(多菌靈0～256μg/mLSDAY)。結(jié)果表明，各菌株對多菌靈的敏感性差異顯著。Pfr6206的菌落生長在六個(gè)菌株中受影響最小，在1.0μg/mL多菌靈濃度下菌落直徑達(dá)到19.2mm，抑制率

5、為41.0％；而Pfr116對多菌靈非常敏感，相同濃度下菌落直徑只有8.2mm，抑制率達(dá)90.2％，其余菌株介于其間。在不同濃度多菌靈脅迫下六株玫煙色擬青霉的單孢菌落形成數(shù)觀察值很好地?cái)M合了邏輯斯蒂方程(r2≥0.90)，由此估計(jì)出各菌株的最低抑菌濃度MIC(單位：μg/mL)：菌株P(guān)fr4205和Pfr116的MIC＜20，表現(xiàn)為低抗性，其余四菌株均表現(xiàn)為中度抗性(20≤MIC≤100)，而Pfr6206的MIC值高達(dá)93.5，很接近

6、MIC＞100的高抗標(biāo)準(zhǔn)，其抗性明顯高于其它菌株。 殺螨卵活性綜合考慮六株玫煙色擬青霉的適溫性和對多菌靈的抗藥性，選擇適溫性和抗藥性較好的菌株P(guān)fr6206、Pfr2175和Pfr4205對朱砂葉螨進(jìn)行殺卵活性的生物測定。采用噴塔法噴霧接種，每菌株設(shè)置11～1677個(gè)孢子/mm2的4個(gè)接種劑量處理。從噴霧接種后第5、6天開始，各處理的螨卵孵化率明顯低于對照，第10天后螨卵孵化率穩(wěn)定不變。將未孵化的卵視為死亡卵，用對照中卵的自然死

7、亡率進(jìn)行校正，即得各菌株感染引起的卵死亡率。三菌株在最高劑量(1202～1677個(gè)孢子/mm2)下引起的螨卵死亡率分別為72.9％、80.8％和30.3％。機(jī)值分析(Probitanalysis)顯示，Pfr6206和Pfr2175對供試螨卵的LC50分別是247和361個(gè)孢子/mm2，說明殺螨卵活性很強(qiáng)；而Pfr4205對螨卵的LC50值高達(dá)4791個(gè)孢子/mm2，顯示殺螨卵活性很差。 結(jié)語根據(jù)各菌株適溫性、抗(耐)多菌靈特性