灰莉的殺螨活性研究.pdf

1、本文以采自廣西桂林的灰莉（Fagraea ceilanica Thunb.）作為研究對(duì)象，用有機(jī)溶劑冷浸提取法提取植物成分，采用浸葉法和噴霧法測(cè)定灰莉植株不同部位提取物對(duì)柑橘紅蜘蛛的觸殺毒力，確定其殺螨活性部位。進(jìn)一步對(duì)活性部位提取物采用液-液萃取、硅膠柱層析等分離純化技術(shù)，將殺螨活性物質(zhì)分離純化，并用波譜分析技術(shù)鑒定殺螨活性成分的結(jié)構(gòu)。研究了殺螨活性物質(zhì)對(duì)柑橘紅蜘蛛的生物活性，以及對(duì)柑橘紅蜘蛛雌成螨體內(nèi)蛋白質(zhì)含量、2種解毒酶和3種保護(hù)

2、酶活性的影響，初步探究了活性物質(zhì)的殺螨作用機(jī)理。
　　采用浸葉法和噴霧法分別測(cè)定了灰莉枝條、葉片甲醇提取物對(duì)柑橘紅蜘蛛雌成螨的觸殺毒力。結(jié)果表明，浸葉法測(cè)定的致死中濃度(LC50)分別為3.4298g/L和4.9236g/L，噴霧法測(cè)定的LC50分別為3.9682g/L和5.5334g/L，2種測(cè)定方法結(jié)果顯示2種甲醇粗提物具有較好的殺螨活性。用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水分別將這2個(gè)粗提物進(jìn)行萃取，并測(cè)定了8個(gè)萃取層的殺螨活性，

3、結(jié)果顯示灰莉枝條石油醚層、灰莉葉水層的殺螨活性較好，濃度為2.5g/L時(shí)，浸葉法測(cè)定這2個(gè)活性萃取層對(duì)柑橘紅蜘蛛雌成螨48h校正死亡率分別為92.11％和94.33％，噴霧法測(cè)定的校正死亡率分別為85.11％和90.8％。噴霧法測(cè)定2個(gè)活性萃取層對(duì)柑橘紅蜘蛛雌成螨的LC50分別為1.7372g/L和3.2970g/L。2個(gè)活性萃取層對(duì)柑橘紅蜘蛛雌成螨還有驅(qū)避活性和產(chǎn)卵忌避活性，最高驅(qū)避率為80.95％，最高產(chǎn)卵忌避率為95.45％。

4、r>　　將2個(gè)活性萃取層分別用硅膠柱層析和薄層層析(TLC)進(jìn)行分離純化，結(jié)合活性跟蹤，從中分離獲得1個(gè)活性化合物。經(jīng)核磁共振(NMR)數(shù)據(jù)分析，初步鑒定為四環(huán)三萜類物質(zhì)。該活性化合物對(duì)柑橘紅蜘蛛雌成螨、若螨、幼螨和卵的觸殺LC50分別為1.5742g/L、1.9888g/L、1.4493g/L和2.4618g/L，濃度為2g/L時(shí)，對(duì)雌成螨的產(chǎn)卵忌避率為95.34％。
　　初步探究了灰莉殺螨活性物質(zhì)的作用機(jī)理。對(duì)柑橘紅蜘蛛雌成螨