印楝油微乳的制備及其體外殺螨活性研究.pdf

1、畜禽螨病是指由疥螨科或癢螨科的螨寄生于畜禽體表引起的一種常見(jiàn)的慢性、接觸性寄生蟲(chóng)病。螨病嚴(yán)重地影響著動(dòng)物的生產(chǎn)性能，甚至造成動(dòng)物死亡，直接影響畜牧業(yè)的發(fā)展，增加飼養(yǎng)與治療成本，給畜牧業(yè)及其相關(guān)產(chǎn)業(yè)造成嚴(yán)重?fù)p失。目前國(guó)內(nèi)外主要采取化學(xué)藥物防治螨病，免疫防治與生物防治方法還在探索中?；瘜W(xué)藥物毒性高、殘留期長(zhǎng)、污染環(huán)境，對(duì)畜產(chǎn)品質(zhì)量安全有重大隱患。所以從植物源性天然藥物中篩選高效、低毒、綠色環(huán)保型高效殺螨劑及其高效的劑型，對(duì)于臨床動(dòng)物螨病的藥

2、物防治和我國(guó)畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展具有重要現(xiàn)實(shí)意義。 現(xiàn)代研究表明從印楝(AzadirachtaindicaA.Juss)種子中提取的印楝油(Neemoil)能有效地控制人和動(dòng)物蜱螨虱等體表寄生蟲(chóng)。目前印楝油制劑主要以乳油劑和水乳劑為主，其中乳油劑存在著環(huán)境污染問(wèn)題，水乳劑容易分層，給生態(tài)環(huán)境和產(chǎn)品質(zhì)量造成一定的不良后果，而且用藥量比較大。針對(duì)印楝油制劑的這些問(wèn)題，根據(jù)微乳劑自身的特點(diǎn)，為開(kāi)發(fā)新型的印楝油微乳制劑，本研究將印楝油既作為

3、藥物，又作為油相，篩選印楝油微乳配方，優(yōu)化印楝油制備工藝。并將制備的印楝油微乳進(jìn)行了體外殺螨活性試驗(yàn)和對(duì)家兔的皮膚刺激性試驗(yàn)。主要研究結(jié)果如下： 1、本實(shí)驗(yàn)用印楝油、吐溫-60(Tween-60，TW-60)、吐溫-80(Tween-80,TW-80)、十二烷基硫酸鈉(Sodiumdodecy1sulfate，SDS)、十二烷基苯磺酸鈉(Sodiumdodecylbenzenesulfonate,SDBS)、甲醇、乙醇、異丙醇、

4、正丁醇、正戊醇、正己醇、正庚醇、正辛醇、丙二醇、丙三醇、聚乙二醇400(Polyethyleneglyco1400,PEG400)、蒸餾水等為原料，制備微乳。在微乳配方的基礎(chǔ)上，用滴定法繪制偽三元相圖，確定微乳區(qū)的分布，再通過(guò)工藝配方優(yōu)化，篩選最佳配方，制備出印楝油微乳。用透射電鏡檢測(cè)印楝油微乳的形態(tài)結(jié)構(gòu)；通過(guò)稀釋、離心、低溫、熱貯和長(zhǎng)期保存試驗(yàn)考察印楝油微乳的穩(wěn)定性。結(jié)果表明：將TW-80、SDBS按4:1質(zhì)量比混勻制成復(fù)合表面活性劑

5、，再將復(fù)合表面活性劑與正己醇醇按質(zhì)量比4:1混勻制成乳化劑體系，然后按質(zhì)量比印楝油：乳化劑體系：水：1:3.5:5.5的比例混合，于40℃水浴中，800r/min攪拌15min，得到的金黃色澄清透明的印楝油微乳液為最佳工藝配方。根據(jù)最佳配方所制備的印楝油微乳為O/W型微乳，在透射電鏡下觀察，所制備的印楝油微乳液滴為球形，大小分布均勻。印楝油微乳經(jīng)過(guò)100倍稀釋、低速高速離心后均無(wú)肉眼可見(jiàn)的外觀變化。印楝油微乳經(jīng)-20℃、4℃、54℃貯藏

6、15d后，除-20℃條件下微乳液發(fā)生凍結(jié)外，均無(wú)明顯外觀變化，且-20℃貯藏后的微乳在室溫條件下能夠再次恢復(fù)為透明的微乳液。長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)表明印楝油微乳自然存放6個(gè)月后仍能無(wú)明顯外觀變化。可見(jiàn)本研究所制備的印楝油微乳從外觀上看是穩(wěn)定的。 2、通過(guò)印楝油不同劑型及其不同劑型空白制劑對(duì)家兔殺滅疥螨的活性來(lái)考察印楝油水乳劑、印楝油液體石蠟溶液及印楝油微乳的殺螨活性。結(jié)果表明：印楝油微乳、印楝油水乳劑、印楝油液體石蠟溶液均具有較強(qiáng)的殺螨

7、活性，將幼螨全部殺死時(shí)間分別為192.50、212.50、337.50min。其中印楝油微乳的全部致死時(shí)間顯著短于印楝油液體石蠟溶液(P＜0.05)，而與印楝油水乳劑無(wú)顯著差異(P＞0.05)。三種制劑的空白制劑對(duì)幼螨全部致死時(shí)間都長(zhǎng)于各自制劑組，分別為231.25、437.50、2495,00min。印楝油微乳、印楝油水乳劑、印楝油液體石蠟溶液對(duì)兔疥螨幼蟲(chóng)半數(shù)致死時(shí)間(LT50)都短于各自空白制劑，分別為81.7463、95.5515

8、、156.6799min，其毒力回歸方程分別為Y=-6.0269+3.1514X、Y=-9.9784+5.0390X、Y=-11.4068+5.1967X。三種印楝油制劑的各自空白制劑對(duì)兔疥螨幼蟲(chóng)的LT50分別為89.0666、165.4010、1576.1946min?？梢?jiàn)印楝油微乳經(jīng)皮吸收能力比水乳劑和石蠟溶液要強(qiáng)，藥效更強(qiáng)。 3、通過(guò)家兔皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)考察空白微乳及低高濃度的印楝油微乳對(duì)動(dòng)物皮膚的刺激性，結(jié)果表明：印楝油微

9、乳一次性給藥皮膚刺激試驗(yàn)在完整皮膚實(shí)驗(yàn)時(shí)，在72h內(nèi)，空白微乳和低高濃度的印楝油微乳的刺激反應(yīng)得分均為0；破損皮膚試驗(yàn)時(shí)，從72h開(kāi)始，空白微乳和低高濃度的印楝油微乳的刺激反應(yīng)得分均為0.33，刺激積分小于0.4。印楝油微乳多次性給藥皮膚刺激試驗(yàn)在完整皮膚實(shí)驗(yàn)時(shí)，空白微乳和低高濃度的印楝油微乳的刺激反應(yīng)得分均為0；破損皮膚試驗(yàn)時(shí)，在除去藥物當(dāng)天，空白微乳和低高濃度的印楝油微乳的刺激反應(yīng)得分均為0.33，刺激積分小于0.4，除去藥物24h