廣州地區(qū)幽門螺桿菌vacA、cagA、iceA基因亞型與兒童上消化道疾病的相關(guān)性研究.pdf

1、目的: 一、探討廣州地區(qū)胃、十二指腸疾病患兒H.pylorivacA、cagA、iceA優(yōu)勢基因亞型，并與國內(nèi)外H.pylori感染患者的優(yōu)勢基因亞型相比較。 二、探討廣州地區(qū)感染H.pylori患兒與未感染H.pylori患兒的胃、十二指腸疾病類型和胃粘膜病變程度的差異。 三、探討廣州地區(qū)兒童感染的H.pylorivacA、cagA、iceA基因亞型與H.pylori胃粘膜定植密度的關(guān)系。 四、探討廣州地區(qū)兒童

2、感染的H.pylori胃粘膜定植密度與胃、十二指腸疾病類型和胃粘膜病變程度的關(guān)系。 材料和方法: 一、材料(一)研究對象 消化道癥狀(如上腹部不適、腹痛、惡心、嘔吐、反酸、噯氣等)需胃鏡檢查的患兒，胃鏡檢查前1個月內(nèi)沒有服用過抗生素、質(zhì)子泵抑制劑、H2受體拮抗劑、非甾體類消炎藥等。本研究共檢查患兒105例，其中女55例，男50例，女：男=1.1：1.0；年齡范圍3～13歲，平均年齡7.7歲，其中0～5歲組24例，6～

3、9歲組52例，10～14歲組29例。 (二)取材 胃竇處距幽門口5厘米內(nèi)取粘膜3塊，1塊用于快速尿素酶反應(yīng)，1塊送病理檢查，1塊用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測vacA、cagA和iceA基因。 二、方法 (一)抽提胃粘膜H.pylori基因組，參考文獻(xiàn)[3,38-42]設(shè)計引物，引物由上海博雅公司和塞百勝公司合成。 (二)聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測目的基因，并將PCR產(chǎn)物純化、連接和轉(zhuǎn)化。

4、(三)測序 M13-47測序引物進(jìn)行PCR產(chǎn)物測序(上海博雅公司)，測序結(jié)果與Pubmed上公布的H.pylori26695序列進(jìn)行對比分析。 (四)統(tǒng)計學(xué)處理 用SPSS12.0forwindows軟件處理數(shù)據(jù)，兩個或兩個以上樣本率的比較采用x2檢驗，校正的x2檢驗，確切概率法，不符合參數(shù)檢驗條件的資料采用秩和檢驗(Mann-WhitneyUtest和Kruskall-WallisHtest)，雙變量等級數(shù)據(jù)采

5、用Spearman等級相關(guān)分析，P＜0.05則認(rèn)為差異有顯著性。 結(jié)果 一、H.pylori檢出結(jié)果 (一)PCR檢測H.pylorivacA、cagA和iceA基因，PCR產(chǎn)物連接轉(zhuǎn)化后送測序，測序結(jié)果與Pubmed上公布的H.pylori26695序列進(jìn)行對比分析，同源性91％以上。 (見附圖測序報告) (二)105例患兒快速尿素酶反應(yīng)均陽性，病理檢查H.pylori陽性53例，PCR檢測陽性

6、64例，其中病理結(jié)果陽性而PCR結(jié)果陰性1例，PCR結(jié)果陽性而病理陰性12例，三項檢查均陽性52例，其中女26例，占24.76％(26/105)，男26例，占24.76％(26/105)，0～5歲組13例，6～9歲組27例，10～14歲組12例。 二、感染H.pylori患兒與未感染H.pylori患兒的胃、十二指腸疾病類型比較 53例患兒感染H.pylori，胃鏡下慢性淺表性胃炎17例，慢性淺表性胃炎合并十二指腸球炎3

7、2例，慢性淺表性胃炎合并十二指腸球部潰瘍4例；52例患兒未感染H.pylori，胃鏡下未見病變者1例，慢性淺表性胃炎18例，慢性淺表性胃炎合并十二指腸球炎32例，慢性淺表性胃炎合并十二指腸球部潰瘍1例。比較感染H.pylori患兒與未感染H.pylori患兒的胃、十二指腸疾病類型，二者差異無顯著性(P＞0.05)。 三、感染H.pylori患兒與未感染H.pylori患兒的胃粘膜病變程度的比較53例患兒感染H.pylori，其中

8、胃粘膜病理診斷為輕度慢性胃炎6例，中度慢性胃炎19例，重度慢性胃炎28例；52例患兒未感染H.pylori，其中粘膜未見病變12例，輕度慢性胃炎31例，中度慢性胃炎6例，重度慢性胃炎3例。比較感染H.pylori患兒與未感染H.pylori患兒的胃粘膜病變程度，二者差異有顯著性(P＜0.05)。感染H.pylori患兒胃粘膜損傷程度較未感染H.pylori患兒嚴(yán)重。 四、PCR檢測H.pylorivacA、cagA、iceA基因

9、亞型 52例患兒中含有H.pylorivacAslaslc/m2、cagA+和iceA1基因組合36例，其余12種基因組合共16例，H.pylorivacAslaslc/m2、cagA+和iceA1基因組合與其它基因組合比較，差異有顯著性(P＜0.01)。 五、H.pylorivacA、cagA、iceA優(yōu)勢基因亞型與胃、十二指腸疾病類型的關(guān)系 慢性淺表性胃炎中感染H.pylorivacAs1aslc/m2亞型菌株的

10、患兒13例，未感染H.pylorivacAs1aslc/m2亞型菌株的患兒3例；慢性淺表性胃炎合并十二指腸球炎中感染H.pylorivacAslaslc/m2亞型菌株的患兒27例，未感染H.pylorivacAslaslc/m2亞型菌株的患兒5例；慢性淺表性胃炎合并十二指腸球部潰瘍中感染H.pylorivacAslaslc/m2亞型菌株的患兒3例，未感染H.pylorivacAslaslc/m2亞型菌株的患兒1例，感染.pyloriva

11、cAslaslc//m2亞型菌株的患兒與未感染H.pylorivacAslaslc/m2亞型菌株的患兒的胃、十二指腸疾病類型的差異無顯著性(P＞0.05)。 六、H.pylorivacA、cagA、iceA優(yōu)勢基因亞型與胃粘膜病變程度的關(guān)系感染HpylorivacAslaslc/m2亞型菌株的患兒中輕度慢性胃炎4例，中度慢性胃炎15例，重度慢性胃炎24例；未感染H.pylorivacAslaslc/m2亞型菌株的患兒中輕度慢性胃

12、炎1例，中度慢性胃炎4例，重度慢性胃炎4例，感染H.pylorivacAslaslc/m2亞型菌株的患兒與未感染H.pylorivacAslaslc/m2亞型菌株的患兒的胃粘膜病變程度的差異無顯著性(P＞0.05)。 七、H.pylorivacA、cagA、iceA優(yōu)勢基因亞型與H.pylori胃粘膜定植密度的關(guān)系(表1) 表1H.pylorivacA、cagA、iceA優(yōu)勢基因亞型與H.pylori胃粘膜定植密度的關(guān)系

13、 定植密度slas1c/m2+slaslc/m2-cagA+cagA-iceA1+iceA1+10111282++919174+++247272283未感染H.pylori患兒共52例，其中胃鏡診斷胃、十二指腸粘膜未見病變1例，慢性淺表性胃炎18例，慢性淺表性胃炎合并十二指腸球炎32例，慢性淺表性胃炎合并十二指腸球部潰瘍1例；H.pylori胃粘膜定植密度“+，，患兒共14例，其中慢性淺表性胃炎6例，慢性淺表性胃炎合并十二指腸球

14、炎7例，慢性淺表性胃炎合并十二指腸球部潰瘍1例；H.pylori胃粘膜定植密度“++”患兒共10例，其中慢性淺表性胃炎2例，慢性淺表性胃炎合并十二指腸球炎8例，無慢性淺表性胃炎合并十二指腸球部潰瘍病例；H.pylori胃粘膜定植密度“+++”患兒共26例，其中慢性淺表性胃炎9例，慢性淺表性胃炎合并十二指腸球炎17例，慢性淺表性胃炎合并十二指腸球部潰瘍3例，H.pylori胃粘膜定植密度在三種胃、十二指腸疾病類型的分布差異無顯著性(P＞0

15、.05)。 九、H.pylori胃粘膜定植密度與胃粘膜病變程度的關(guān)系 胃粘膜病理診斷無H.pylori感染患兒共52例，其中未見病變12例，輕度慢性胃炎31例，中度慢性胃炎6例，重度慢性胃炎3例；H.pylori胃粘膜定植密度“+，，患兒共14例，其中輕度慢性胃炎6例，中度慢性胃炎7例，重度慢性胃炎1例；H.pylori胃粘膜定植密度“++”患兒共10例，其中無輕度慢性胃炎病例，中度慢性胃炎6例，重度慢性胃炎4例；H.p

16、ylori胃粘膜定植密度“+++，，患兒共29例，無輕度慢性胃炎病例，中度慢性胃炎6例，重度慢性胃炎23例，H.pylori胃粘膜定植密度在胃粘膜病變程度的分布差異無顯著性(P＞0.05)。 結(jié)論 一、感染H.pylori患兒的胃粘膜損傷程度較未感染H.pylori患兒嚴(yán)重，H.pylori感染與三種胃、十二指腸疾病類型無關(guān)。 二、廣州地區(qū)兒童感染的H.pylorivacA、cagA、iceA的優(yōu)勢基因亞型是va

17、cAslaslc/m2、cagA+和iceA1；H.pylorivacAslaslc/m2、cagA+和iceA1基因組合是廣州地區(qū)兒童感染的H.pylori的優(yōu)勢基因組合，容易導(dǎo)致嚴(yán)重胃炎。 三、H.pylori胃粘膜定植密度與三種胃、十二指腸疾病類型無相關(guān)性，H.pylori胃粘膜定植密度與胃粘膜損害程度無相關(guān)性。 四、H.pylori胃粘膜定植密度與H.pylorivacA、cagA、iceA優(yōu)勢基因亞型vacAs