HLA-Ⅱ類基因和TCRVβ鏈在特應(yīng)性皮炎的表達(dá).pdf

1、目的： 特應(yīng)性皮炎(AD)是一種慢性炎癥性皮膚病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，本實(shí)驗(yàn)通過研究AD的HLA-Ⅱ類基因多態(tài)性及變應(yīng)原誘導(dǎo)的TCRVβ鏈多態(tài)性表達(dá)，探討其發(fā)病的分子免疫學(xué)機(jī)制。 方法： 1、采用皮內(nèi)點(diǎn)刺法對(duì)40名AD患者進(jìn)行了皮膚過敏原測定，找出常見的過敏原。 2、用序列特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)，對(duì)AD患者進(jìn)行HLA-DRB等位基因分型，并計(jì)算了HLA-DRB基因分型的相對(duì)危險(xiǎn)度，找出AD的易感基因

2、和抗性基因。 3、用放射變應(yīng)原吸附實(shí)驗(yàn)(RAST)檢測所有患者血清抗hl slgE、抗dl sIgE、抗d2 sIgE、抗mx2 slgE、抗fx5E slgE值，進(jìn)行基因型和特異性抗原的相關(guān)性研究。 4、運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測特異性變應(yīng)原誘導(dǎo)的TCRVl3鏈的多態(tài)性表達(dá)。 結(jié)果： 1、過敏原檢測：過敏原陽性率前四名依次為塵螨(45％)、塵土(37.5％)，混合吸入過敏原(30％)，春季花粉Ⅱ(22.5％)。

3、 2、HLA-DRB等位基因分型檢測：AD組的HLA-DR<,3>的基因頻率高于對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；HLA-DR<,6>的基因頻率低于對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AD組HLA-DR<,3>的RR值是6.33>4，說明HLA-DR<,3>與AD有較肯定的相關(guān)性。AD的HLA-DR<,6>的RR值為0.13<1，說明HLA-DR<,6>是AD患者的抗性基因，具有HLA-DR<,6>的個(gè)體較不易患AD。 3、40例患者中有HLA-DR

4、<,3>陽性表達(dá)的有16例，其中1例抗hlslgE陽性、3例抗dlslgE陽性、12例抗d2slgE陽性、1例抗mx2slgE陽性、4例抗fX5EsIgE陽性，HLA-DR<,3>陽性患者中抗d2slgE陽性率比HLA-DR<,3>陰性患者中抗d<,2>slgE陽性率高。 4、不論是AD組還是健康對(duì)照組外周血淋巴細(xì)胞經(jīng)塵螨抗原刺激前后TCRVβ的表達(dá)量均無明顯差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但是AD組TCRVβ18<'+>T細(xì)胞的表達(dá)量在塵螨

5、刺激后(2.19±2.04)較刺激前有明顯的增高(1.26±1.49)，增長了1.5倍以上。其中一名患者TCRVβ18的基礎(chǔ)表達(dá)值為0.56％，塵螨抗原刺激后表達(dá)量上升到3.99％。而17CRVβ18<'+>T細(xì)胞單純受分裂素(PHA)刺激后表達(dá)量無明顯改變。 結(jié)論： 1、塵螨是AD患者最常見的過敏原，是導(dǎo)致AD加重的常見過敏因素。 2、AD組的HLA-DR<,3>的基因頻率高于對(duì)照組；而HLA-DR<,6>的基

6、因頻率低于對(duì)照組。HLA-DR<,3>是AD的易感基因， HLA-DR<,6>是AD的抗性基因。 3、AD組的易感基因HLA-DR<,3>與抗d<,2>slgE有相關(guān)性，提示了塵螨抗原很可能是被抗原呈遞細(xì)胞呈遞后，與HLA-DR<,3>形成特異性復(fù)合物，進(jìn)一步刺激T細(xì)胞的分化，導(dǎo)致機(jī)體免疫失調(diào)。 4、經(jīng)塵螨抗原刺激后AD組TCRVβ18<'+>T細(xì)胞表達(dá)量較刺激前增高，TCRVβ18<'+>T細(xì)胞可能在塵螨誘發(fā)AD中起一