妊娠期瘦素受體水平分析及其與妊娠期糖尿病的相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景:
　　妊娠期糖尿病(Gestational Diabetes Mellitus,GDM)指在妊娠期出現(xiàn)或首次診斷的不同程度的糖耐量受損(不包括糖尿病合并妊娠),它對(duì)母兒的健康造成不同程度的危害。研究發(fā)現(xiàn),除胰島素外,瘦素也是GDM發(fā)病過程中的重要參與者。
　　瘦素通過與瘦素受體(leptin receptor,LepR)結(jié)合而啟動(dòng)瘦素的生物學(xué)功能。目前被人們認(rèn)知的瘦素受體共6種亞型,可分為跨膜瘦素受體(a、b、c、

2、d、f)和可溶性瘦素受體(e)?？缒な菟厥荏w常表達(dá)于下丘腦中樞及外周組織,主要參與瘦素功能的發(fā)揮?？扇苄允菟厥荏w(soluble leptin receptor,sLR)主要存在于外周血中,是瘦素結(jié)合、運(yùn)轉(zhuǎn)蛋白,參與調(diào)節(jié)瘦素的生物可利用率、敏感性等,而人類sLR由金屬蛋白酶水解跨膜瘦素受體胞外區(qū)脫落而成,故sLR可反映跨膜瘦素受體的表達(dá)情況,因此跨膜瘦素受體的異?？蓪?dǎo)致sLR濃度發(fā)生變化。
　　妊娠時(shí)胎盤可表達(dá)瘦素及跨膜瘦素受體,

3、胎盤瘦素是孕母血瘦素升高的主要來源,而胎盤跨膜瘦素受體可水解生成sLR,造成血sLR隨妊娠進(jìn)展而升高,這可促進(jìn)瘦素生物活性的發(fā)揮,使正常妊娠時(shí)糖脂代謝維持平衡。GDM時(shí),跨膜瘦素受體和/或sLR的濃度與GDM的聯(lián)系尚無研究明確。但有關(guān)于代謝綜合征及2型糖尿病的研究指出肥胖個(gè)體存在高瘦素血癥、低sLR水平,具有明顯的瘦素抵抗;且血清低sLR將導(dǎo)致2型糖尿病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加,這些研究都顯示血清sLR水平與肥胖、瘦素抵抗、胰島素抵抗負(fù)相關(guān)。那么G

4、DM時(shí),是否存在血清sLR異常和/或生成sLR的原料——跨膜瘦素受體的異常而導(dǎo)致嚴(yán)重的瘦素抵抗、胰島素抵抗,目前仍不明確。因此本研究旨在從瘦素受體角度探討妊娠期糖尿病與正常妊娠間的是否存在差異,使 GDM機(jī)制的研究進(jìn)一步深入,為GDM的防治提供理論依據(jù)。
　　目的:
　　從瘦素受體出發(fā),分析了解正常妊娠、GDM孕婦血清 sLR濃度隨孕周變化特點(diǎn)及GDM發(fā)病是否與血sLR濃度改變相關(guān),了解孕晚期胎盤及脂肪組織sLR生成者——跨

5、膜瘦素受體的表達(dá)情況,從而揭示瘦素受體(特別是 sLR)異常是否與 GDM相關(guān)聯(lián),為探索GDM的發(fā)病機(jī)制提供可能的新視點(diǎn)。
　　方法:
　　1、隨機(jī)選取孕14-19周、30-34周及足月孕分娩前(≧37周)三個(gè)孕齡段正常妊娠孕婦各100例、同孕齡 GDM孕婦(排除合并其他疾病)各20例及未孕健康女性20例。采用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法測(cè)定各組血清可溶性瘦

6、素受體(sLR)水平,分析正常妊娠孕婦和 GDM孕婦兩組孕婦血 sLR水平隨孕周變化特點(diǎn),比較兩組間同孕齡血sLR水平有無差異性,研究血sLR濃度與GDM發(fā)生有無相關(guān)性;
　　2、 Western blotting、熒光定量qRT-PCR法檢測(cè)正常孕婦及GDM孕婦足月孕時(shí)胎盤和脂肪組織的長(zhǎng)型跨膜瘦素受體(long form of leptin receptor,OB-Rfl)、短型跨膜瘦素受體(short form of lept

7、in receptor,OB-Rfs)蛋白水平及mRNA水平,比較兩組間是否存在差異,推測(cè)跨膜瘦素受體變化是否與 GDM相關(guān),進(jìn)一步證實(shí)跨膜受體來源的sLR與GDM的相關(guān)性。
　　結(jié)果:
　　第一部分:(1)正常妊娠組各孕齡期sLR濃度均顯著高于未孕組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且組內(nèi)各亞組間相比差異均具有顯著性(P<0.05),即隨著妊娠孕齡進(jìn)展,sLR濃度升高;
　　(2) GDM孕婦各孕齡段sLR濃度分別

8、與未孕組相比,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),且隨孕周增加該組內(nèi)各亞組間sLR濃度無顯著性差異(P>0.05);而GDM組內(nèi)各亞組孕婦sLR濃度均顯著低于同孕齡段正常妊娠組(P<0.05);
　　(3)在a:<4.0ng/ml、b:4.0~7.9ng/ml、c:8.0~11.9ng/ml、d:≥12.0ng/ml4個(gè)sLR濃度水平上,GDM例數(shù)及所占比例分別為29(30.53％)、20(15.63%)、9(13.64%)、2(

9、2.82%),兩兩比較GDM比例,差異具有顯著性(P<0.05,除b與c間比較P>0.05),GDM比例隨血清sLR濃度升高而降低。
　　第二部分:正常妊娠和GDM組孕婦胎盤組織OB-Rfl、OB-Rfs蛋白和mRNA的表達(dá)均顯著高于脂肪組織(P<0.05);與正常妊娠組相比,GDM組脂肪組織OB-Rfl、OB-Rfs蛋白和mRNA的表達(dá)均升高(P<0.05);而GDM孕婦胎盤組織上,OB-Rfl蛋白和mRNA表達(dá)均降低,OB-R

10、fs蛋白和mRNA表達(dá)卻升高,差異具有顯著性(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.正常妊娠時(shí),孕婦血 sLR濃度顯著高于未孕時(shí),且隨著妊娠進(jìn)展顯著升高;GDM患者 sLR濃度與未孕期無顯著性差異,也不隨孕周增加而變化,但卻顯著低于同孕期正常妊娠孕婦;孕婦血清sLR濃度越低,則GDM發(fā)生的可能性越高,這提示sLR濃度降低引起妊娠期瘦素抵抗增強(qiáng),糖脂代謝紊亂,從而導(dǎo)致GDM發(fā)生。
　　2.足月孕時(shí),正常妊娠、GDM孕婦胎