硬膜外麻醉復(fù)合全麻下?lián)Q瓣術(shù)體外循環(huán)前后心肌基因表達譜的研究.pdf

1、第一章硬膜外復(fù)合全麻下聯(lián)合瓣膜置換術(shù)的臨床觀察 目的：建立單純?nèi)楹陀材ね鈴?fù)合全麻下風心病聯(lián)合瓣膜置換術(shù)的模型，記錄臨床過程的變化，為下一步的研究打下基礎(chǔ)。 方法：選擇20例風濕性心臟病患者，擬在體外循環(huán)下行聯(lián)合瓣膜置換術(shù)，分為全麻組(GA組，n=10)和硬膜外復(fù)合全麻組(GEA組，n=10)，GEA組患者于術(shù)前一天晚上，在T2-3或T3-4間隙行硬膜外腔置管保留。第二天入手術(shù)室先局麻下置SWAN-GANZ導管，GEA組

2、在首次劑量起效，麻醉平面達T1-T6，血流動力學指標穩(wěn)定后，兩組均以咪達唑侖、芬太尼、丙泊酚和維庫溴胺行全麻誘導，芬太尼和丙泊酚維持麻醉。記錄入室(T1)、全麻醉誘導后(T2)、劈胸骨(T3)、轉(zhuǎn)流30min(T4)、停機30min(T5)、停機2h(T6)、停機4h(T7)、停機24h(T8)的HR、MAP以及T1、T5、T6、T7、T8的CVP、MPAP、PCWP、CI、SVR、PVR等參數(shù)的變化。分別測T1、T2、T4、T6、T7

3、、T8時點血漿皮質(zhì)醇和T1、T6、T7、T8時點血漿肌鈣蛋白cTn-I濃度。術(shù)后分別進行硬膜外PCA鎮(zhèn)痛和靜脈PCA鎮(zhèn)痛，記錄清醒拔管時間以及VAS評分。 結(jié)果：1、GA組HR于T3、T7較T1顯著增高(P<0.05)，GEA組HR于T2、T3較T1顯著下降(p<0.01)，在T2、T3、T6、T7、T8均顯著慢于GA組；GA組MAP除T3外，均顯著低于T1；GEA組MAP于各時間點均低于T1，兩組在T3、T4、T7、T8有顯著

4、性差異；兩組MPAP、PCWP于T6、T7、T8低于T1，組間無顯著性差異；兩組CVP術(shù)中有波動，組內(nèi)組間無顯著性差異；GA組CI于T5、T6較T1顯著增高，GEA組T5-T8均較T1顯著增高，且于T7、T8點顯著高于GA組(P<0.05)；兩組SVR于T5較T1顯著降低，組間無顯著性差異；GA組PVR無顯著性變化，GEA組于T5、T6、T8較T1顯著下降。2、兩組入室的皮質(zhì)醇無差異，于T4開始增高，持續(xù)到T8，GA組T4、T6、T7、

5、T8顯著高于GEA組(P<0.01)。3、兩組入室的cTn-I無差異，T7，T8增高，GEA組在T7，T8時點均小于GA組(P<0.05)。4、GEA組較GA組蘇醒早，拔管早，VSA評分低于GA組。 結(jié)論：通過對臨床指標和血漿皮質(zhì)醇，肌鈣蛋白的觀察，相對于單純?nèi)橄嘛L心病聯(lián)合瓣膜置換術(shù)，硬膜外復(fù)合全麻可以減少圍術(shù)期應(yīng)激反應(yīng)，改善圍術(shù)期血流動力學指標，對心肌有保護作用，患者恢復(fù)早，并提供更滿意的術(shù)后鎮(zhèn)痛。 第二章

6、目的：通過基因芯片技術(shù)，分別對單純?nèi)橄潞陀材ね鈴?fù)合全麻下聯(lián)合瓣膜置換術(shù)體外循環(huán)前后心肌基因表達譜進行研究，找出差異表達基因并進行分析。 方法：取第一章單純?nèi)榻M(D組)，硬膜外復(fù)合全麻組(E組)中各三例女性患者轉(zhuǎn)流前后的右心耳組織，成功提取RNA后，與美國Agilent公司的44K人類全基因寡核苷酸芯片雜交，觀察CPB前后心肌基因表達譜的變化，對差異基因(上調(diào)或下調(diào)大于2倍以上)進行聚類分析和基因本體分析。 結(jié)果：1、

7、CPB后，“D組共同差異基因”有286個探針上調(diào)，313個探針下調(diào)；2、CPB后，“E組共同差異基因”有280個探針上調(diào)，240個探針下調(diào)；3、六張芯片cy3，cy5均一化后的聚類分析結(jié)果：CPB后122個探針上調(diào)(其中有24條基因上調(diào)3倍以上)，215個探針下調(diào)(其中有42條基因下調(diào)3倍以上)；4、六張芯片直接聚類分析結(jié)果顯示有11條功能已知基因(MND1，ADRA2A，MT1H，GLS，PDIA2,JUN，ANLN，MCF2，RAS

8、D1，CTSB,TPM1)CPB前后的變化代表了麻醉方法的差異：5、GO分類顯示其中在分子功能小類中與凋亡調(diào)節(jié)、細胞粘附分子，防御免疫蛋白、運動活性有關(guān)的基因中，“D組共同差異基因”比“E組共同差異基因”顯著增多，均在五倍以上。 結(jié)論：1、體外循環(huán)前后心肌基因表達譜發(fā)生了很大的變化，主要涉及基因自身的表達與調(diào)控、炎性反應(yīng)、免疫反應(yīng)、宿主防御以及細胞凋亡等方面；2、單純?nèi)榻M和硬膜外復(fù)合全麻組在體外循環(huán)后心肌基因發(fā)生變化的數(shù)目有

9、很大的不同，尤其在與凋亡調(diào)節(jié)，細胞粘附分子，防御免疫蛋白，運動活性等分子功能有關(guān)的基因；3、六張芯片聚類分析結(jié)果提示有11條功能已知基因的差異表達與不同的麻醉方法有關(guān)聯(lián)。 第三章利用實時熒光定量PCR對凋亡相關(guān)基因的驗證 目的：驗證芯片結(jié)果的可靠，探討硬膜外復(fù)合全麻在體外循環(huán)心肌缺血再灌注損傷中可能通過抗凋亡途徑保護心肌。 方法：選擇第二章聚類得到的差異基因TPM1、c-Jun以及內(nèi)參基因GAPDH，以芯片雜交實