氨基多糖納米微?？谷烁渭毎┑淖饔门c機理研究.pdf

1、氨基多糖是一種天然的陽離子多糖，因其具有無毒、生物兼容性、可降解性和低免疫原性等一系列獨特的特性而被廣泛應用于食品、制藥、生物醫(yī)學等多個領(lǐng)域。氨基多糖納米微粒因具有黏膜黏附性和提高大分子在黏膜上的穿透能力，而主要作為一種藥物載體來進行藥物控釋，靶向給藥等方面的研究。本課題組在前期研究中發(fā)現(xiàn)，氨基多糖納米微粒具有抗腫瘤活性，在腫瘤的治療中具有一定的應用前景。
　　 本研究通過體外細胞培養(yǎng)和裸鼠移植瘤模型，對氨基多糖納米微粒抗肝細胞

2、癌的效果和機理作了初步的研究，旨在為氨基多糖納米微粒應用于肝癌治療提供科學依據(jù)。
　　 主要研究結(jié)果如下：
　　 1.通過乙酸酐乙?；?，降低氨基多糖的脫乙酰度(D.D.)，并將其制備成納米微粒，與相同條件下制備的高脫乙酰度的氨基多糖納米微粒的形態(tài)特征對比發(fā)現(xiàn)，低D.D.氨基多糖的粒徑較大，Zeta電位較低，在溶劑中分布不均，穩(wěn)定性較差。體外對人肝癌細胞BEL-7402增殖抑制率測定結(jié)果顯示兩種D.D.氨基多糖納米微粒均

3、能抑制BEL-7402的生長，并都在一定濃度范圍內(nèi)具有劑量依賴性。高D.D.的氨基多糖納米微粒對BEL-7402的抑制率明顯高于低D.D.的氨基多糖納米微粒。提示：氨基多糖分子上的氨基是維持其納米微粒形態(tài)，發(fā)揮抗腫瘤活性的關(guān)鍵基團。
　　 2.腫瘤細胞蛋白鞘磷脂酶活性分析結(jié)果顯示，氨基多糖納米微粒能引起腫瘤細胞中性鞘磷脂酶(nSMase)和酸性鞘磷脂酶(aSMase)活性的升高。提示：鞘磷脂酶活性升高可能是氨基多糖納米微粒引起腫

4、瘤細胞死亡的主要機理之一。
　　 3.裸鼠人肝癌SMMC-7721移植瘤實驗結(jié)果顯示，在實驗的21d，與溶劑組（陰性對照）相比，口服氨基多糖納米微粒的試驗組的相對腫瘤增殖率T/C為61.68％，阿霉素組（陽性對照組）為48.67％，均對裸小鼠移植瘤的生長有明顯的抑制作用(P<0.05)。移植瘤中壞死面積占總面積的比例測算結(jié)果顯示，陽性對照組為35.26±11.87％，試驗組為42.25±3.83％，均顯著大于陰性對照組(20.6

5、1±3.84％)(p<0.01)。肝和肺組織的形態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)，氨基多糖納米微粒能有效改善因為腫瘤生長而引起的肝、肺的組織損傷。
　　 4.移植瘤免疫組化研究結(jié)果顯示，與對照組相比，氨基多糖納米微粒能顯著抑制血管內(nèi)皮生長因子受體VEGFR2(P<0.01)和增殖細胞核抗原PCNA的表達(P<0.05)，但對血管內(nèi)皮生長因子VEGF的表達則沒有影響。實時熒光定量PCR分析結(jié)果顯示，氨基多糖與阿霉素均能顯著抑制VEGFR2的轉(zhuǎn)錄(P<0