不同培養(yǎng)體系下小鼠4，8-細(xì)胞胚胎卵裂球發(fā)育質(zhì)量與能力的研究.pdf

1、卵裂球分離以及胚胎分割技術(shù)在農(nóng)業(yè)、生物學(xué)及醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域已得到廣泛應(yīng)用，但是其培養(yǎng)體系仍有待于進(jìn)一步完善。為了建立更為簡單而高效的卵裂球培養(yǎng)體系，提高其發(fā)育質(zhì)量和能力，本實(shí)驗(yàn)比較了培養(yǎng)液中不同成分對昆明小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球體外發(fā)育的影響，并采用體細(xì)胞共培養(yǎng)對小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球體外培養(yǎng)體系進(jìn)行優(yōu)化，觀察了不同體細(xì)胞類型對小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球發(fā)育的影響。此外，還對中間受體培養(yǎng)體系在小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球發(fā)育上

2、的影響進(jìn)行了研究。 對昆明小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球體外培養(yǎng)的研究結(jié)果表明，CZB是一種簡單而有效的昆明小鼠卵裂球體外培養(yǎng)體系。在本實(shí)驗(yàn)條件下，未發(fā)現(xiàn)?；撬釋?，8-細(xì)胞單個卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細(xì)胞數(shù)的促進(jìn)作用。這可能是由于本試驗(yàn)使用的培養(yǎng)體系和小鼠品系不同造成的，同時也說明了并不是在所有實(shí)驗(yàn)條件下添加牛磺酸都能提高小鼠胚胎的體外發(fā)育能力。而實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)，在有葡萄糖存在時，小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單個卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細(xì)

3、胞數(shù)均有顯著的提高。單一培養(yǎng)體系中小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單個卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細(xì)胞數(shù)分別達(dá)到38％、12.43和20％、8.48。為了改善小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球的體外發(fā)育環(huán)境，在實(shí)驗(yàn)中將小鼠4，8-細(xì)胞胚胎單卵裂球與豬輸卵管上皮和顆粒細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，并比較了共培養(yǎng)和單一培養(yǎng)體系中單卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細(xì)胞數(shù)的差異。結(jié)果表明，豬輸卵管上皮細(xì)胞共培養(yǎng)體系中小鼠卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細(xì)胞數(shù)明顯高于單一培養(yǎng)體系，其囊胚發(fā)育率和囊

4、胚細(xì)胞數(shù)分別達(dá)到47％、17.57和26％、11.43，表明豬輸卵管上皮細(xì)胞共培養(yǎng)體系可顯著促進(jìn)其體外發(fā)育的質(zhì)量和潛力。而豬顆粒細(xì)胞共培養(yǎng)體系沒有顯著促進(jìn)小鼠卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細(xì)胞數(shù)，同單一培養(yǎng)體系培養(yǎng)效果相比差異不顯著。 中間受體的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明兔輸卵管能夠較好的促進(jìn)卵裂球的發(fā)育質(zhì)量，但是胚胎丟失嚴(yán)重，回收率低。而將小鼠卵裂球移入同種發(fā)情母鼠的子宮培養(yǎng)，其胚胎的回收率仍然很低。這些研究結(jié)果說明其主要原因可能是自然存在的體內(nèi)