Ag85A與Ag85BDNA疫苗聯(lián)合應(yīng)用對移植性鼠膀胱腫瘤的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng).pdf

1、本文研究目的：探討聯(lián)合應(yīng)用Ag85A與Ag85B DNA疫苗抗膀胱腫瘤的免疫效應(yīng)。 研究方法：采用體外培養(yǎng)的小鼠膀胱腫瘤細胞株BTT739，皮下注射T739小鼠的左后肢內(nèi)側(cè)，成功構(gòu)建可移植性小鼠膀胱腫瘤模型。取48只，隨機數(shù)字表法隨機分為6組，即生理鹽水組、pcDNA3.1+組、卡介苗(BCG)組、pcDNA-Ag85A組、pcDNA-Ag85B組以及pcDNA -Ag85A+pcDNA-Ag85B組。荷瘤后第7天、14天和21

2、天各肌注1次，末次肌注后7天處死小鼠，流式細胞儀檢測各組小鼠脾臟的CD4<'+>和CD8<'+>T細胞亞群數(shù)量及所占百分比并計算CD4<'+>/CD8<'+>比值；酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法檢測小鼠血清中的干擾素γ(γ-IFN)分泌水平；定期測量腫瘤大小，計算腫瘤體積；剝離腫瘤稱重并作腫瘤組織病理學檢查。 研究結(jié)果： 1．經(jīng)雙酶切鑒定，成功提取重組質(zhì)粒pcDNA-Ag85A及pcDNA-Ag85B。 2．C

3、D4<'+>和CD8<'+>T細胞亞群流式細胞學檢測結(jié)果：Ag85A與Ag85B DNA疫苗聯(lián)合免疫組CD4<'+>和CD8<'+>T細胞亞群的數(shù)量及CD4<'+>/CD8<'+>的比值明顯高于DNA疫苗單獨免疫組，差異有顯著性(p<0.05)，但不及BCG組(p<0.05)。 3．小鼠血清IFN-γ水平的ELISA檢測結(jié)果：Ag85A與Ag85B DNA疫苗聯(lián)合免疫組小鼠血清IFN-γ的水平明顯高于DNA疫苗單獨免疫組，差異有

4、顯著性(p<0.05)，但不及BCG組(p<0.05)。 4．腫瘤稱重：Ag85A與Ag85B DNA疫苗聯(lián)合免疫組小鼠的腫瘤重量明顯低于DNA疫苗單獨免疫組，差異有顯著性(p<0.05)，但高于BCG組(p<0.05)。 5.月中瘤組織病理學變化：Ag85A與Ag85B DNA疫苗聯(lián)合免疫組腫瘤壞死(核濃縮、核碎裂、核溶解，胞漿紅染)較DNA疫苗單獨免疫組明顯，且瘤體周圍及瘤體內(nèi)炎細胞(中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞)