試驗(yàn)劑量Ag85A與Ag85B DNA疫苗對膀胱癌大鼠血液系統(tǒng)及肝腎功能的影響.pdf

1、研究背景：自1976年Morales首次將卡介苗(Bacille Calmette-Guerin BCG)應(yīng)用于淺表性膀胱腫瘤術(shù)后灌注預(yù)防復(fù)發(fā)以來，BCG膀胱灌注已成為膀胱腫瘤輔助治療的一種重要手段，并且，目前BCG是美國FDA唯一批準(zhǔn)的膀胱內(nèi)灌注藥物。但BCG膀胱內(nèi)灌注毒副作用大，患者難以堅(jiān)持完成整個(gè)灌注療程，從而影響療效。Ag85(antigen85 complex，Ag85)復(fù)合體是BCG培養(yǎng)濾液中主要的分泌蛋白，是由Ag85A，

2、Ag85B，Ag85C組成的30-32 kDa蛋白家族。Ag85A、Ag85B蛋白已被國內(nèi)外多家實(shí)驗(yàn)室成功構(gòu)建出DNA疫苗，且用于免疫膀胱癌小鼠并且觀察到對荷瘤小鼠的抑瘤率和存活延長率與BCG治療結(jié)果相近。但這二種基因疫苗是否也會給受試動物帶來系統(tǒng)毒副作用未見到明確報(bào)道。 目的：探討試驗(yàn)劑量Ag85A與Ag85B DNA疫苗對膀胱癌大鼠血液系統(tǒng)及肝腎功能的影響，確定其有無系統(tǒng)毒副作用，進(jìn)而評價(jià)這二種疫苗抗腫瘤的安全性。

3、方法：致癌劑N-甲基亞硝基脲(methyl nitrosourea，MNU)膀胱灌注雌性wistar大鼠制備膀胱腫瘤模型。將建模成功48只大鼠隨機(jī)分為Ag85A+Ag85B DNA疫苗組，Ag85B DNA疫苗組，Ag85A DNA疫苗組，卡介苗組，空白質(zhì)粒組和生理鹽水組，各8只，建模后第7、14、21天于大鼠右后肢肌肉注射給藥。第28天處死大鼠，腹主動脈采血進(jìn)行血細(xì)胞學(xué)檢測，血清學(xué)檢測，并對肝臟、腎臟進(jìn)行病理組織學(xué)檢查；觀察Ag85A

4、疫苗和Ag85B疫苗的毒副作用。 結(jié)果： 1．成功建立大鼠膀胱癌模型，致瘤率100％； 2．經(jīng)治療后，治療組大鼠血中白細(xì)胞(WBC)、淋巴細(xì)胞(LYM)數(shù)較空白質(zhì)粒組和生理鹽水組均在增高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；Ag85ADNA+Ag85BDNA疫苗組較單用Ag85ADNA，Ag85BDNA疫苗組增高幅度較大，與單用Ag85ADNM芟苗組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，與Ag85BDNA疫苗組、BCG組相

5、比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)； 3．尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)測定值無論是單獨(dú)使用還是聯(lián)合使用DNA疫苗組變化均不明顯，與生理鹽水組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。而BCG組變化明顯，與生理鹽水組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，與Ag85ADNA，Ag85BDNA，Ag85ADNA+Ag85BDNA組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。其余血液學(xué)指標(biāo)實(shí)驗(yàn)組與對照組相比均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別； 4．病理學(xué)檢查Ag85AD