早期母子隔離應(yīng)激對(duì)幼鼠癲癇易感性的影響及其機(jī)制的研究.pdf

1、第一部分母子隔離應(yīng)激對(duì)幼鼠癲癇易感性的影響
　　 目的：探討早期母子隔離應(yīng)激對(duì)幼鼠氯化鋰-皮羅卡品和杏仁核點(diǎn)燃刺激誘導(dǎo)癲癇模型易感性的影響。
　　 方法：66新生SD大鼠幼鼠（孕鼠由重慶醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供）用于實(shí)驗(yàn)，隨機(jī)分成3組：正常對(duì)照組（n=22），母子隔離15分鐘組（幼鼠出生當(dāng)天計(jì)為PO，生后2天開始至生后15/17天，采用母子隔離方法，每天同一時(shí)間把幼鼠單獨(dú)置于安靜、保暖環(huán)境15分鐘，每次隔離結(jié)束后把幼鼠放

2、回籠中，n=22）、母子隔離3h組（隔離方法同前、每天隔離3小時(shí)，n=22）。在生后16/18天三組幼鼠分別行氯化鋰-皮羅卡品/杏仁核刺激誘導(dǎo)的驚厥實(shí)驗(yàn)。
　　 結(jié)果：與正常組比較，P2-P15/17每天母子隔離3小時(shí)應(yīng)激組，氯化鋰-皮羅卡品誘導(dǎo)驚厥發(fā)作的潛伏期明顯縮短（p<0.05）；杏仁核點(diǎn)燃驚厥閾值降低、完全點(diǎn)燃所需刺激次數(shù)減少、驚厥發(fā)作程度顯著加重（p<0.05），而P2-P15/17每天母子隔離15分鐘應(yīng)激組與正常組幼

3、鼠在以上幾個(gè)方面比較則無顯著性差異（p>0.05）。
　　 結(jié)論：早期母子隔離3小時(shí)的應(yīng)激可通過縮短氯化鋰--皮羅卡品誘導(dǎo)驚厥發(fā)作的潛伏期、降低杏仁核點(diǎn)燃驚厥閾值、減少完全點(diǎn)燃所需的刺激次數(shù)，導(dǎo)致幼鼠兩種癲癇模型易感性增加。
　　 第二部分母子隔離應(yīng)激對(duì)海馬GABAα1表達(dá)及CA1區(qū)椎體神經(jīng)元興奮性的影響
　　 目的：初步探索早期母子隔離應(yīng)激增加幼鼠癲癇易感性的機(jī)制。
　　 方法：30只新生SD大鼠幼鼠用

4、于實(shí)驗(yàn)，隨機(jī)分成3組，正常對(duì)照組（n=10），母子隔離15分鐘組（幼鼠出生當(dāng)天計(jì)為PO，生后2天開始至生后15天，采用母子隔離方法，每天同一時(shí)間把幼鼠單獨(dú)置于安靜、保暖環(huán)境15分鐘，每次隔離結(jié)束把幼鼠放回籠中，n=10）、母子隔離3h組（隔離方法同前、每天隔離3小時(shí)，n=10）。P16天，4％多聚甲醛加生理鹽水灌注取腦，用免疫組組織化化染色方法檢測(cè)各組幼鼠海馬各區(qū)（主要是：CA1、CA3和齒狀回）GABAA受體α1亞單位的表達(dá)情況。制作

5、海馬腦片，全細(xì)胞膜片鉗檢測(cè)三組海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元自發(fā)性放電的特征。
　　 結(jié)果：正常對(duì)照組GABAA受體α1亞單位表達(dá)主要集中在海馬的CA1區(qū)、CA3區(qū)、齒狀回。母子隔離15min組GABAA受體α1亞單位免疫化學(xué)累積光密度在以上三個(gè)區(qū)域與對(duì)照組比較無顯著性差異（p>0.05），母子隔離3h組在海馬CA1區(qū)GABAA受體α1亞單位免疫化學(xué)累積光密度較對(duì)照組明顯降低（p<0.01），而在海馬CA3、齒狀回GABAA受體α1亞單

6、位免疫化學(xué)累積光密度較正常組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p>0.05）。幼鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元自發(fā)性放電頻率，正常組為：1.15±0.69 Hz，母子隔離3h組為：3.64±2.84Hz，明顯比正常組要快（p<0.01）、而母子隔離15min組為：1.36±0.83 Hz，與正常組比較無顯著性差異（p>0.05）。
　　 結(jié)論：早期母子隔離3小時(shí)的應(yīng)激通過增加海馬CA1錐體神經(jīng)元興奮性、減少GABAA受體α1亞單位表達(dá)，導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)興