金屬蛋白酶解離素9在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用研究.pdf

1、胰腺癌是人體常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在中國(guó)、日本、西歐各國(guó)均為發(fā)病率高的惡性腫瘤，病程短，進(jìn)展快，早起無(wú)明顯或特異的癥狀和體征，臨床診斷時(shí)大多屬晚期，具有高度侵襲性，多存在鄰近器官和血行轉(zhuǎn)移，預(yù)后極差，通常一年生存率不到10％，五年生存率不到5％，中位生存率僅為3-4個(gè)月.其治療的首選方案為手術(shù)，但長(zhǎng)期的臨床實(shí)踐表明，對(duì)于胰腺癌的治療，單純手術(shù)的治療效果是有限的，同時(shí)由于腫瘤耐藥性的產(chǎn)生，目前常用于胰腺癌的一些化療藥物的治療效果也不佳，單藥

2、化療近期療效低于10％.因此，為了提高胰腺癌患者的總的生存率，現(xiàn)在急切需要研究新的有效的治療方法，比如新的化療藥，介入治療和基因治療，而進(jìn)一步提高胰腺癌治療效果的關(guān)鍵則在于加強(qiáng)基礎(chǔ)研究，對(duì)其發(fā)病機(jī)理和分子生物學(xué)特性的進(jìn)一步闡明可以進(jìn)一步推動(dòng)新型分子水平的靶向治療藥物的發(fā)展和新的治療方案的產(chǎn)生。金屬蛋白酶解離素9是金屬蛋白酶解離素家族中的一員，主要以其金屬蛋白酶活性和與整合素結(jié)合的能力廣泛參與人類多種疾病的發(fā)生發(fā)展，尤其是腫瘤性疾病。深入

3、研究ADAM9在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用有助于找到新的靶點(diǎn)，從而為腫瘤治療提供新的方法。
　　 目的：金屬蛋白酶解離素9是金屬蛋白酶解離素家族中的一員，最近研究結(jié)果表明ADAM9在乳腺癌、胃癌，大腸癌肝癌、黑色素瘤、非小細(xì)胞性肺癌、前列腺癌等組織和細(xì)胞中高表達(dá)，能提高腫瘤細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移的能力，和腫瘤發(fā)生，侵襲，轉(zhuǎn)移有關(guān)。因此，本實(shí)驗(yàn)的目的就是研究ADAM9在胰腺癌細(xì)胞中的作用，以期為胰腺癌治療尋找新的靶點(diǎn)。
　　 方法：篩

4、選ADAM9高表達(dá)胰腺癌細(xì)胞系，應(yīng)用ADAM9 siRNA阻斷ADAM9蛋白表達(dá)，Westem Blotting檢測(cè)其干擾效應(yīng)，MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖能力變化，transwell體外遷移實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞遷移性交化，transwell體外侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲性變化，體外3D細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞集落形成能力變化情況。
　　 使用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x±s表示，數(shù)據(jù)錄入SPSS16.0完成統(tǒng)計(jì)分析，對(duì)所有計(jì)量資料均

5、先進(jìn)行單樣本K-S正態(tài)分布檢驗(yàn)，屬正態(tài)分布進(jìn)行t檢驗(yàn)，如屬于非正態(tài)分布進(jìn)行非參數(shù)檢驗(yàn)(秩和檢驗(yàn)).P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P<0.01有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，
　　 結(jié)果：RT-PCR結(jié)果顯示三種胰腺癌細(xì)胞系中，PANC-1細(xì)胞系較其他兩種細(xì)胞系高表達(dá)ADAM9基因；Western Blotting結(jié)果顯示ADAM9 siRNA處理后，pro-ADAM9-L和ADAM9-L蛋白表達(dá)幾乎檢測(cè)不到，ADAM9-S蛋白也明顯減少；MTT結(jié)

6、果顯示ADAM9 siRNA處理后，ADAM9 siRNA處理組胰腺癌細(xì)胞的增殖受到一定程度的抑制；Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)和遷移實(shí)驗(yàn)顯示ADAM9蛋白表達(dá)抑制后胰腺癌細(xì)胞的侵襲能力和遷移能力受到明顯抑制；細(xì)胞3D培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)顯示ADAM9 siRNA處理組胰腺癌細(xì)胞的集落形成能力顯著降低，
　　 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)以人胰腺癌PANC-1細(xì)胞系為對(duì)象，研究ADAM9基因在胰腺癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移和集落形成能力方面的作用，研究結(jié)果表