RAGE在不同轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞系中的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究RAGE在不同轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞系中的表達(dá)差異，及其對(duì)肝癌細(xì)胞增殖、侵襲及遷移能力的影響，并探討NF-κB信號(hào)通路在此過程中的作用。
　　 方法：本研究選取無轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞系Hep3B、低轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞系MHCC97L及高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系HCCLM3作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過RT-PCR、Western blot、ELISA方法分別檢測(cè)RAGEmRNA、RAGE蛋白表達(dá)及細(xì)胞上清液中可溶性RAGE（sRAGE）的水平，

2、并選取高轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞系HCCLM3，采用體外siRNA干擾、外源加入RAGE抗體或sRAGE蛋白的方法進(jìn)行干預(yù)，運(yùn)用MTT及臺(tái)盼藍(lán)方法檢測(cè)HCCLM3細(xì)胞的增殖活性、Transwell小室檢測(cè)細(xì)胞的侵襲能力、細(xì)胞劃痕愈合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移能力，RT-PCR和Western blot方法檢測(cè)NF-κB P50、P65 mRNA及蛋白的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：1.高轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞系HCCLM3 RAGE mRNA及蛋白表達(dá)

3、水平均高于低及無轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞系MHCC97L、Hep3B，細(xì)胞上清中sRAGE的水平與人肝癌細(xì)胞系的轉(zhuǎn)移潛能負(fù)相關(guān)。2.siRNA干擾RAGE表達(dá)或RAGE抗體、sRAGE蛋白抑制RAGE信號(hào)傳導(dǎo)后HCCLM3細(xì)胞的增殖活性、侵襲及遷移能力均減弱。3.RAGE表達(dá)減弱或RAGE信號(hào)通路受抑后HCCLM3細(xì)胞NF-κBP50、P65 mRNA及蛋白表達(dá)水平均下降。
　　 結(jié)論：1.人肝癌細(xì)胞系表達(dá)RAGE的水平與其轉(zhuǎn)移潛能相