氨肽素N抑制劑在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究.pdf

1、目的：篩選出抗腫瘤活性較高的氨肽酶N抑制劑，建立該化合物體內(nèi)、體外的含量檢測(cè)方法并對(duì)其在大鼠體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究。
　　方法：
　　1、分別采用高效液相色譜法、MTT比色法等方法對(duì)候選化合物的穩(wěn)定性、藥理活性進(jìn)行評(píng)價(jià)、篩選。
　　2、采用蛋白沉淀的血漿預(yù)處理方法處理Bes-5FU的血漿樣品，色譜柱為VenusilASB C18(4.6 mm×250 mm，5μm)柱，Bes-5FU的流動(dòng)相為乙腈-0.05％甲酸

2、(22∶78，v/v)，流速為1ml/min，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為262.7nm，并對(duì)方法的線性、靈敏度、精密度、提取率、穩(wěn)定性等進(jìn)行考察。
　　3、采用液液萃取的血漿預(yù)處理方法處理5-氟尿嘧啶的血漿樣品，色譜柱為Venusil ASB C18(4.6 mm×250 mm，5μm)柱，5-氟尿嘧啶的流動(dòng)相為甲醇-水(5∶95，v/v)，流速為1ml/min，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為266.3nm，并對(duì)方法的線性、靈敏度、精密度、提取率、穩(wěn)定性等進(jìn)

3、行考察。
　　4、進(jìn)行大鼠體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究，健康Wistar雄性大鼠六只，體重250-260g，實(shí)驗(yàn)前禁食12h，但自由飲水，于給藥后0.033，0.083，0.167，0.333,0.5,1，2，3，4，6，8和10h經(jīng)眼底靜脈叢取血后置于經(jīng)肝素抗凝的EP管中，于4℃、8609×g離心3min分離血漿，分別采用蛋白沉淀法和液液萃取法進(jìn)行血漿樣品的預(yù)處理;采用高效液相色譜法進(jìn)行血漿樣品的檢測(cè)，記錄峰面積，繪制藥時(shí)曲線;采用D

4、AS2.0分析軟件（中國(guó)藥理學(xué)會(huì)），利用非隔室模型計(jì)算給藥后的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。
　　結(jié)果：
　　1、篩選出的目標(biāo)化合物Bes-5FU在藥理活性、穩(wěn)定性等方面均符合要求。
　　2、Bes-5FU的保留時(shí)間為11.5min;標(biāo)準(zhǔn)曲線為:y=5336.1x-1702.1(r=0.9996)，最低定量限為:0.3μg/ml; Bes-5FU低、中、高（0.5、5和10μg/ml）三個(gè)質(zhì)量濃度的提取回收率分別為65.3±5.2％，6

5、6.7±4.3％和68.2±4.1％(n=6);Bes-5FU的低、中、高三個(gè)質(zhì)量濃度（0.5、5和10μ g/ml）的日內(nèi)、日間精密度RSD均小于15％(n=6)。
　　3、5-氟尿嘧啶的保留時(shí)間為6min;標(biāo)準(zhǔn)曲線為:y=37118x-9030.1(r=0.9998)，最低定量限為:0.1μg/ml;5-氟尿嘧啶低、中、高（0.25、5和10μg/ml）三個(gè)質(zhì)量濃度的提取回收率分別為70.4±7.4％，76.2±7.1％和75

6、.7±6.8％(n=6);5氟尿嘧啶的低、中、高三個(gè)質(zhì)量濃度（0.25、5和10μ g/ml）的日內(nèi)、日間精密度RSD均小于10.0％(n=6)。
　　4、采用大鼠股靜脈注射給藥，給藥劑量為84mg/kg，給藥后血漿中Bes-5FU的主要代謝產(chǎn)物5-氟尿嘧啶的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)t1/2(h)、MRT0-t(h)、AUC0-t(μg·h/mL)、AUC0-∞(μg·h/mL)、AUMC0-t(μg·h2/mL)、AUMC0-∞(μg·h

7、2/mL)分別為0.14±0.04、0.17±0.04、17.73±6.27、17.78±6.31、2.77±0.59、3.07±0.63。
　　結(jié)論：
　　1、篩選出的目標(biāo)化合物Bes-5FU穩(wěn)定性較好、藥理活性較高，可對(duì)其成藥性進(jìn)行深入研究。
　　2、建立了Bes-5FU的高效液相檢測(cè)方法，該方法靈敏度高、準(zhǔn)確性好，可用于Bes-5FU在大鼠體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究。
　　3、對(duì)Bes-5FU在大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)