PPARγ-PGC-1α對(duì)Nrf2-γ-GCS-h表達(dá)的影響及其在支氣管哮喘發(fā)病中作用.pdf

1、背景：由催化重鏈（γ-GCS-HS）和調(diào)節(jié)輕鏈（γ-GCS-LS）組成γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-glutamylcysteine synthetase，γ-GCS）是清除氧化劑的第一道防線，也是參與支氣管哮喘的一種非常重要的抗氧化酶。紅系衍生的核因子2相關(guān)因子2(NF-E2-related factor2,Nrf2)通過與抗氧化反應(yīng)元件(ARE)結(jié)合,上調(diào)γ-GCS等抗氧化基因表達(dá),在抗氧化應(yīng)激反應(yīng)中處于核心地位。體外研究表明過氧化

2、物酶體增殖物激活受體-γ（Peroxisome proliferator activated receptors-gammar,PPARγ)是配體激活的一種核內(nèi)受體，PGC-1α（Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-1α）是一種能與PPARγ結(jié)合并上調(diào)PPARγ的轉(zhuǎn)錄輔激活因子，PPARγ/PGC-1α可通過與 Nrf2啟動(dòng)子上的過氧化物酶體增殖反應(yīng)元

3、件（PPAR-response elements,PPREs)結(jié)合而上調(diào)Nrf2/γ-GCS-h的表達(dá)。
　　目的：探討從整體水平PPAR-γ/PGC-1α在支氣管哮喘急性發(fā)作時(shí)對(duì)Nrf2/γ-GCS-h表達(dá)的作用機(jī)制及其在支氣管哮喘發(fā)病中的影響。
　　方法：實(shí)驗(yàn)分兩部分。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分：40只健康雄性豚鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（A組）、哮喘組（B組）、地塞米松治療組（C組）和羅格列酮治療組（D組），卵蛋白致敏法復(fù)制哮喘模型，檢測(cè)四組

4、豚鼠肺組織勻漿和肺泡灌洗液炎癥細(xì)胞中丙二醛和活性氧濃度。RT-PCR法、原位雜交法分別檢測(cè)肺組織PPAR-γ、PGC-1α、Nrf2、γ-GCS mRNA和肺泡灌洗液炎癥細(xì)胞中PPAR-γ、Nrf2、γ-GCS mRNA的表達(dá)。Western blot法、免疫細(xì)胞（組織）化學(xué)法分別檢測(cè)肺泡灌洗液炎癥細(xì)胞中PPAR-γ、Nrf2、γ-GCS蛋白質(zhì)和肺組織的PPAR-γ、PGC-1α、Nrf2、γ-GCS蛋白質(zhì)的表達(dá)。臨床實(shí)驗(yàn)部分：健康對(duì)照

5、組、哮喘患者治療前、治療后均行肺功能檢測(cè)。檢測(cè)三組痰液炎癥細(xì)胞中丙二醛和活性氧濃度；免疫細(xì)胞化學(xué)法和原位雜交法檢測(cè)各組痰液細(xì)胞中PPAR-γ、Nrf2、γ-GCS的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　（1）豚鼠肺組織和肺泡灌洗液炎癥細(xì)胞中丙二醛濃度（nmol/mg.prot）和活性氧濃度哮喘組均高于對(duì)照組和治療組（P均<0.05）。哮喘患者炎癥細(xì)胞中丙二醛和活性氧濃度均高于健康對(duì)照組和治療后組（P均<0.05）。

6、　?。?）豚鼠肺組織中PPAR-γ、PGC-1α、Nrf2、γ-GCS的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)B組低于A組，C組和D組（P均<0.05）。
　?。?）豚鼠BALF炎癥細(xì)胞中PPAR-γ、Nrf2、γ-GCS的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)B組低于A組，C組和D組（P均<0.05）
　?。?）哮喘患者痰中細(xì)胞內(nèi)PPAR-γ、Nrf2、γ-GCS的mRNA和蛋白表達(dá)治療后高于治療前（P均<0.05）。
　?。?）豚鼠肺組織、BALF炎

7、癥細(xì)胞和哮喘患者痰液細(xì)胞內(nèi)Nrf2/γ-GCS-h與PPAR-γ/PGC-1α表達(dá)呈正相關(guān)（P均<0.05），且Nrf2/γ-GCS-h和PPAR-γ/PGC-1α的表達(dá)與丙二醛和活性氧表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)（P均<0.05）。
　　結(jié)論：氧化/抗氧化失衡在豚鼠支氣管哮喘發(fā)病中起重要作用，Nrf2/γ-GCS有保護(hù)作用。PPAR-γ/PGC-1α可上調(diào)Nrf2/γ-GCS表達(dá)，提高抗氧化性和降低氧化性，而對(duì)組織/細(xì)胞起保護(hù)作用?？寡字委熢?/p>