臍血干細胞與骨髓干細胞聯(lián)合移植治療肝衰竭的實驗研究.pdf

1、背景及目的：
　　 我國急性肝功能衰竭發(fā)生率高，其病理特點是大塊或亞大塊肝細胞壞死，而殘存肝細胞的增殖受到各種因素的抑制難以再生。原位肝移植是治療終末期肝病的有效方法，但因供肝不足，價格昂貴，而且需要終身服用免疫抑制劑等諸多因素限制了其臨床應用。
　　 干細胞移植作為輔助治療方法是肝移植的重要補充。目前已經(jīng)有大量實驗研究證實干細胞在一定的條件下能夠向肝細胞定向分化。本文主要觀察臍血干細胞和自體骨髓干細胞共同移植治療D-g

2、al所致大鼠急性肝衰竭療效，為臨床干細胞共移植治療肝衰竭提供實驗依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.采集，培養(yǎng)干細胞：采集大鼠臍血和骨髓后，在培養(yǎng)體系中加入特定的細胞因子：促肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor，HGF)，干細胞因子(Stem cell factor，SCF)，觀察細胞生長情況，培養(yǎng)21天后對細胞進行檢測，采用免疫細胞化學檢測培養(yǎng)后的細胞是否表達肝細胞特征產(chǎn)物白蛋白(ALB)和甲胎

3、蛋白(AFP)。
　　 2.動物實驗：D-gal1.4g/kg腹腔注射建立大鼠急性肝衰竭模型。將建模后24小時存活的大鼠隨機分成4組。每日（總共7天）分別經(jīng)鼠尾靜脈注入單獨的臍血干細胞或骨髓干細胞以及混合后的臍血干細胞及骨髓干細胞或生理鹽水0.8ml。觀察4組大鼠存活率，肝功能及肝組織病理變化程度。
　　 結(jié)果：
　　 1.在SCF，HGF的誘導下，臍血干細胞和骨髓干細胞可以在體外擴增并分化為肝細胞。
　　

4、 2.1.4g/kgD-gal所致肝衰竭鼠3天病死率達80％，組織學見大面積肝壞死，血清轉(zhuǎn)氨酶，膽紅素明顯升高。而干細胞治療組72小時存活率明顯升高，肝組織病變明顯減輕，血清轉(zhuǎn)氨酶，膽紅素明顯降低。
　　 3.臍血干細胞和骨髓干細胞共同移植治療組存活率(77％)高于臍血干細胞治療組(57％)和骨髓干細胞治療組(50％)，統(tǒng)計學比較，肝功能及組織學改善也優(yōu)于臍血干細胞治療組和骨髓干細胞治療組。
　　 結(jié)論：