伊布利特對兔左室中層細胞瞬間外向鉀電流活性的影響.pdf

1、目的：心臟病的死亡率在我國躍居前列，室速、室顫等嚴重的心律失常是心血管疾病死亡的根本原因。CAST(心律失常抑制試驗)和SWORD(口服d-索他洛爾試驗)等提示：抗心律失常藥物的研究方向已轉(zhuǎn)到了鉀通道阻滯劑尤其是能同時阻滯一種以上離子通道的鉀離子阻滯劑上。伊布利特作為一種新型Ⅲ型抗心律失常藥于1995年12月獲FDA批準，1996年在美國上市。多數(shù)認為伊布利特是對新近發(fā)生的心房顫動和心房撲動的首選轉(zhuǎn)復(fù)藥物。其對室性心律失常的動物試驗表明

2、：伊布利特能抑制室速和室顫的發(fā)生，可使除顫的閾值降低，對心室顫動有較好的防治作用。臨床上對冠脈疾病患者的電生理研究發(fā)現(xiàn)，使用伊布利特后心室肌的有效不應(yīng)期(ERP)，QT間期和心室單相動作電位(APD)均延長，且呈劑量依賴性。研究發(fā)現(xiàn)心室壁中層的心肌細胞，即M細胞具有獨特的電生理特性：如動作電位呈典型的“峰和圓頂”狀，且呈明顯的慢頻率依賴性，這些特點決定了M細胞在折返性心律失常發(fā)生中起重要作用。瞬間外向鉀電流(Ito)是參與心肌復(fù)極的重要

3、離子流，它參與了動作電位復(fù)極化的1相和2相，形成動作電位1相切跡，并和L型鈣通道共同形成動作電位平臺期。以往的研究證實了伊布利特對復(fù)極時鉀外向電流(Ikr)的抑制作用，但對于瞬間外向鉀電流的作用未見報道。本課題利用膜片鉗技術(shù)，旨在探討伊布利特對左心室肌M細胞瞬間外向鉀電流活性的變化，從而探討伊布利特的抗室性心律失常機制。 材料與方法： 1.實驗動物新西蘭大白兔60只，體重1.5～2.0kg。20只作為正常對照組，20只作

4、為伊布利特10-5mol/L組，20只作為伊布利特10-6mol/L組。 2.細胞分離利用酶解(膠原酶，Sigma公司)的方法分離心室肌細胞，定位方法：緊鄰心外膜側(cè)1～1.5mm為外膜層細胞(Epi)，心外膜下2～3mm取心肌中層細胞(Mcells)。 3.藥物富馬酸伊布利特由北京紅惠生物制藥有限公司提供，實驗時在Ito灌流液中加入伊布利特使其最終濃度達到10-5mol/L、10-6mol/L。 4.電流記錄應(yīng)用

5、膜片鉗全細胞的記錄方法，記錄正常對照組、伊布利特10-5mol/L組和10-6mol/L組細胞Ito活性的變化。電流記錄的刺激程序由pulse+pulsefit8.53軟件控制，通道信號由EPC-9膜片鉗放大器放大，通過Ag-AgcL電極絲和填充電極內(nèi)液的微電極導(dǎo)入細胞，產(chǎn)生的電流信號經(jīng)EPC-9轉(zhuǎn)換，為pulse+pulsefit8.53軟件采集、分析。 5.統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS11.0軟件包作統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料以均數(shù)±標

6、準差(-x±s)表示，首先進行組間均衡性檢驗，兩組計量資料采用t檢驗，成組資料間比較采用方差分析，以P＜0.05為有顯著性差異的標準。 結(jié)論： 1.本研究結(jié)果顯示：10-5mol/L、10-6mol/L伊布利特組各電壓下Ito電流密度不同程度的下降，激活電壓右移，電流-電壓曲線均下移，失活迅速，失活曲線、半數(shù)失活電壓明顯左移，失活后再恢復(fù)減慢，顯示瞬間外向鉀通道在用藥后受到抑制，延長1相復(fù)極，從而引起動作電位復(fù)極時程的延

7、長。 2.伊布利特對心肌細胞Ito的抑制作用呈濃度依賴性，高濃度組伊布利特的抑制作用明顯強于低濃度組。 3.快速心律失常的發(fā)生機制90％以上為折返激動所致，近年來發(fā)現(xiàn)心室肌細胞電生理活動的不均一性，在折返性室性心律失常的發(fā)生和維持中起著重要的作用。Ito離子流的跨壁復(fù)極分布差異和梯度是心肌電生理活動不均一性的突出表現(xiàn)，是導(dǎo)致2相全或無復(fù)極、動作電位平臺期不一致改變和2相折返的最重要的離子流之一。伊布利特抑制Ito，使復(fù)極