兔左室壁三層心肌細(xì)胞非特異性陽(yáng)離子電流的特性.pdf

1、兔左室壁三層心肌細(xì)胞非特異性陽(yáng)離子電流的特性研究表明，心臟左室游離壁心內(nèi)膜下心肌，心外膜下心肌，中層心肌(M層)之間的復(fù)極存在差異，即存在心室跨壁復(fù)極離散度(TansmuralDispersionofRepolarization，TDR)。已知TDR在心室折返性心律失常的發(fā)生和維持中起重要作用，而M細(xì)胞與TDR的形成密切相關(guān)。M細(xì)胞指心外膜下接近心室肌中層的一組獨(dú)特的細(xì)胞亞群，該細(xì)胞與其它部位的心室肌細(xì)胞有著完全不同的電生理特性，其中最

2、顯著的特點(diǎn)是較長(zhǎng)的動(dòng)作電位時(shí)程(ActionPotentialDurastion，APD)，這為折返性室性心律失常的發(fā)生提供了電生理基礎(chǔ)，同時(shí)也成為臨床上一些抗心律失常藥物的治療靶點(diǎn)。M細(xì)胞的APD之所以較心內(nèi)膜心肌細(xì)胞和心外膜心肌細(xì)胞長(zhǎng)，主要是由于M細(xì)胞的IKs較小，同時(shí)也與M細(xì)胞有較大的INa-Ca和晚期INa有關(guān)。而在兔的心肌細(xì)胞上IKs的分布較小。近幾年，人們?cè)谕眯募〖?xì)胞發(fā)現(xiàn)了一種新的離子通道電流—非特異性陽(yáng)離子通道電流(non

3、selectivecationchannel，INs)，目前發(fā)現(xiàn)該通道電流主要包括牽張激活的INs；細(xì)胞外無(wú)鈣誘發(fā)的INs；胰島素激活I(lǐng)Ns，瞬時(shí)內(nèi)向電流ITi等。已有研究表明，INs與牽引發(fā)的心房顫動(dòng)有關(guān)。因此INs越來(lái)越受到大家的重視，正在形成一個(gè)研究高潮。而INs與M細(xì)胞APD的關(guān)系，目前國(guó)際上未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。 目的：1、以兔左心室單個(gè)心肌細(xì)胞為研究對(duì)象，利用全細(xì)胞鉗制技術(shù)，觀(guān)察兔左心室肌細(xì)胞是否存在INs并探討其阻斷劑。

4、 2、INs在左室心肌細(xì)胞分布的異質(zhì)性，初步探討其在TDR形成中的意義。 方法：使用膜片鉗全細(xì)胞鉗制技術(shù)，在單細(xì)胞離子通道水平，對(duì)單個(gè)心肌細(xì)胞進(jìn)-1-行電壓、電流鉗制，記錄INs并比較其在三層心肌細(xì)胞的分布密度，分析其電流—電壓曲線(xiàn)。 結(jié)果：1、家兔左心室肌細(xì)胞去極化時(shí)可以引出一組外向電流，灌流液中加入4-AP(5mmol/L)阻斷后，該外向電流的峰值部分明顯減小，減小的峰值電流為Ito，仍剩余一個(gè)較大的外向電流，

5、我們將其稱(chēng)為穩(wěn)態(tài)電流。 2、當(dāng)NMDG+取代Na+，該離子的流的內(nèi)向部分明顯減小，但氯離子的阻斷劑DIDS對(duì)該離子流沒(méi)有影響。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證明該離子通道對(duì)單價(jià)陽(yáng)離子K+、Cs+、Na+、Li+通透，對(duì)氯離子不能通透，因此是一種非特異性陽(yáng)離子通道電流。由于其沒(méi)有時(shí)間依賴(lài)性失活與激活，是一種背景性電流，翻轉(zhuǎn)電位約-40mV。GdCl3(0.1mmol/L)和LaCl3(0.1mmol/L)對(duì)該電流有阻斷作用。 3、該通道電流

6、的密度在內(nèi)層心肌細(xì)胞、M細(xì)胞、外層心肌細(xì)胞的分布不同；當(dāng)鉗制電壓為-80mV時(shí)，內(nèi)層心肌細(xì)胞、M細(xì)胞、外層心肌細(xì)胞的電流密度分別為-0.44PA/PF±0.05PA/PF，-0.12PA/PF±0.05PA/PF，-0.28PA/PF±0.07PA/PF，內(nèi)層心肌細(xì)胞和外層心肌細(xì)胞的電流密度較M細(xì)胞大，p=0.015和p=0.018，而內(nèi)層心肌細(xì)胞和外層心肌細(xì)胞電流通道密度無(wú)顯著差異，p=0.093；當(dāng)鉗制電壓為+30mV時(shí)，內(nèi)層心肌細(xì)

7、胞、M細(xì)胞、外層心肌細(xì)胞的電流密度分別為1.09PA/PF±0.29PA/PF，0.38PA/PF±0.09PA/PF，0.90PA/PF±0.24PA/PF，內(nèi)層心肌細(xì)胞和外層心肌細(xì)胞的電流密度較M細(xì)胞大，p=0.023和p=0.019，而內(nèi)層心肌細(xì)胞和外層心肌細(xì)胞電流通道密度無(wú)顯著差異，p=0.73(n內(nèi)=12，n中=12，n外=10)。 結(jié)論：1、兔左心室存在INa，對(duì)單價(jià)陽(yáng)離子Na+，K+，Li+，Cs+通透，對(duì)Cl-不

8、通透，GdCl3(0.1mmol/L)和LaCl3(0.1mmol/L)對(duì)該電流有阻斷作用。 2、該離子通道無(wú)明顯的時(shí)間依賴(lài)性激活與失活，是一種背景性電流，翻轉(zhuǎn)電位大約為-40mV，可能在靜息電位(RP)的形成中起到一定作用。 -2-3、該電流通道密度在左室的分布存在異質(zhì)性，其中M細(xì)胞的電流通道密度明顯小于心內(nèi)膜下心肌細(xì)胞和心外膜下心肌細(xì)胞，因此該電流可能與Iks一起共同作用使M細(xì)胞的APD延長(zhǎng)，可能對(duì)TDR的形成及折返