人腫瘤壞死因子-α基因轉(zhuǎn)導(dǎo)對(duì)絨癌耐藥細(xì)胞系JEG-3-VP2耐藥性逆轉(zhuǎn)的體內(nèi)外研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文人腫瘤壞死因子α基因轉(zhuǎn)導(dǎo)對(duì)絨癌耐藥細(xì)胞系JEG3VP2耐藥性逆轉(zhuǎn)的體內(nèi)外研究姓名：馮鳳芝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：楊秀玉向陽2002.9.1中髫醫(yī)學(xué)科學(xué)睫中星姆秘醫(yī)科大學(xué)j￡京按和醫(yī)院搏學(xué)位論文llllTNF旺基因轉(zhuǎn)導(dǎo)對(duì)絨癌耐藥細(xì)胞系JEG3_撐P2耐藥性逆轉(zhuǎn)的體內(nèi)外研究中文摘要目的：絨癌是發(fā)生于生育年齡婦女的高度惡性月中瘸，對(duì)化療敏感，是入類最早治愈的實(shí)體瘸之一?；熓蔷}癌的主要治療方法。對(duì)

2、化療藥物產(chǎn)生耐藥是治療失敗的主要原因。耐藥病人的死亡率仍穩(wěn)#徊戎60％左右，對(duì)黼藥患者的治療策略亟待受薪。緘瘞的耐藥多數(shù)勢(shì)獲褥性醚藥，溜擾逆轉(zhuǎn)孛瘩已經(jīng)形成懿多藥瓣藥，燕進(jìn)一步提高絨癌洽療靜有效途徑。本斬究擬應(yīng)甭蒺西工獠技術(shù)將細(xì)胞西子蘩因(huTNFn)導(dǎo)入已建立的絨癌耐藥細(xì)胞系JEG一3／VP2，觀察huTNFa旗因轉(zhuǎn)導(dǎo)對(duì)絨癌細(xì)胞耐藥性逆轉(zhuǎn)的體內(nèi)外作用。方法：本研寇用RTPCR的方法克隆huTNFG基因，綴酶切、連接烽huTNFa基因糖

3、入囊核表達(dá)載俸pcDNA31myehis()孛，提取屢粒，鼴潮棗子驀湊俸將huTNFd慕因?qū)司c癬耐藥細(xì)胞系JEG3／VP2牽，稻G418篩選含huTNFacDNA片段的單細(xì)胞克隆，襝測(cè)轉(zhuǎn)導(dǎo)后細(xì)胞對(duì)VP16耐藥指數(shù)的變化。用RTPCR的方法，測(cè)定轉(zhuǎn)導(dǎo)前后細(xì)胞MDRlmRNA的表達(dá)情況。建立絨癌耐藥細(xì)胞系裸鼠移植蠛模毅，測(cè)定轉(zhuǎn)導(dǎo)翦后移植瘦的癯重，用RTPCR方法瓢免痰組織化學(xué)方法，梭測(cè)huTNFa基因轉(zhuǎn)導(dǎo)后，絨瘞耐藥纓飚移楗瘤中MDRlm

4、RNA稚MDRI疆自(Pgp)表遮永平的改變。結(jié)果：轉(zhuǎn)導(dǎo)huTNFa基因的絨癌耐藥細(xì)胞中有huTNFamRNA的表達(dá)，對(duì)VP16的耐藥性與束轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞相比明顯下降(Po05)MDRlmRNA的表達(dá)水乎明盥下降。轉(zhuǎn)導(dǎo)huTNFa基因灼絨痙瓣藥纓臌系的癯燕明顯低于寒轉(zhuǎn)導(dǎo)綴，差髯有疆著性(P磴。05)。轉(zhuǎn)導(dǎo)huTNF8蒸因熬移植癌耐藥性鞠顯下洚，MDRlmRNA和MDRl諼白表達(dá)永平萌箍低于采轉(zhuǎn)譯耐蓊細(xì)胞(P005)。結(jié)論：huTNFn基因的轉(zhuǎn)