Fis1和Mfn1表達及氧化應激在慢性氟中毒大鼠腎小管上皮細胞線粒體損傷中的作用.pdf

1、目的:研究線粒體分裂蛋白1(Mitochondrialfissionprotein1,Fis1)和線粒體融合蛋白1(Mitochondrialfusinprotein1,Mfn1)表達及氧化應激在慢性氟中毒大鼠腎小管上皮細胞線粒體損傷中的作用,探討慢性氟中毒腎臟細胞線粒體損傷發(fā)病機制,為地方性氟中毒的防治提供理論依據。
　　方法:L60只SD(SpragueDawley)大鼠隨機分為3組,每組20只,組內雌雄各半;對照組飲用自來水

2、(含氟量低于0.5mg/L),低氟組、高氟組分別飲用加氟10mg/L、50mg/L的自來水。分別于3、6個月末經股動脈放血處死大鼠后取腎臟組織;采用氟離子選擇電極法檢測大鼠尿氟;采用實時熒光定量PCR法和免疫組織化學法檢測腎臟組織Fis1和Mfn1表達;采用硫代巴比妥酸法測定丙二醛(Malondialdehyde,MDA),比色法測定總抗氧化能力(Totalantioxidantcapacity,T-AOC);光鏡觀察腎臟組織學結構,透

3、射電鏡觀察腎小管上皮細胞線粒體超微結構;實驗結果作統(tǒng)計學分析。
　　結果:(1)染氟組大鼠出現不同程度的氟斑牙,高氟組重于低氟組。(2)染氟組大鼠尿氟含量高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(3)染氟組大鼠腎臟組織Fis1在轉錄水平和蛋白水平表達高于對照組,而Mfn1在轉錄水平和蛋白水平表達低于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(4)染氟組大鼠腎臟組織MDA水平高于對照組,而T-AOC水平低于對照組,差異有統(tǒng)計學

4、意義(P<0.05)。(5)光鏡下可見染氟組大鼠腎小管上皮細胞胞漿疏松淡染。(6)透射電鏡下可見染氟組大鼠腎小管上皮細胞線粒體嵴模糊或者消失和線粒體腫脹,線粒體分裂截面出現。
　　結論:攝入過量的氟引起染氟組大鼠腎臟組織Fisl在轉錄水平和蛋白水平表達升高,Mfn1在轉錄水平和蛋白水平表達降低,促進線粒體分裂并抑制線粒體融合,導致融合分裂失衡和線粒體超微結構改變。Fis1和Mfn1表達與氧化應激之間存在相互影響的可能,該過程在慢性