陰道超聲照射對早孕胚胎絨毛細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、目的：隨著輔助生殖技術(shù)的開展，陰道超聲廣泛用于卵泡監(jiān)測、取卵及多胎妊娠減胎術(shù)等過程中，且趨于早期化、多次化。因此，陰道超聲照射對生殖細(xì)胞及胚胎潛在的生物效應(yīng)及其安全性越來越受到重視。經(jīng)陰道超聲照射對胚胎及胎兒是否安全，近幾年有關(guān)報道較多，但多為動物實驗或離體組織細(xì)胞研究，而關(guān)于人早孕胚胎絨毛細(xì)胞凋亡方面研究較少。本研究的目的是探討陰道超聲照射宮腔孕囊一定時間后，人體早孕胚胎組織絨毛細(xì)胞凋亡的變化，以期為臨床陰道超聲照射時限提供新的佐證。

2、 方法：選擇擬行人工流產(chǎn)的60例健康早孕婦女，隨機數(shù)字法分為四組：對照組(未照射)、照射3min、照射5min和照射10min組。應(yīng)用探頭頻率5.0-MHz的陰道超聲，對孕囊進行不同時間持續(xù)照射。照射后24小時行人工流產(chǎn)取絨毛。采用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的原位末端標(biāo)記法(TUNEL)行細(xì)胞凋亡的組織學(xué)檢測，免疫組織化學(xué)方法(S-P法)檢測促/抑凋亡基因Bax和Bcl-2蛋白在組織中的表達。 結(jié)果: 原位末端標(biāo)記法(TU

3、NEL)檢測絨毛細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示，對照組早孕絨毛中有少量凋亡細(xì)胞存在，照射組凋亡細(xì)胞數(shù)目增加，照射3min組出現(xiàn)凋亡細(xì)胞數(shù)目增多但與對照組之間差異無顯著性(P>0.05)。照射5min及照射10min組的凋亡細(xì)胞數(shù)目明顯增加，與對照組及照射3min組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。而照射10min組與照射5min組之間凋亡細(xì)胞數(shù)目差異亦有顯著性(P<0.01)。免疫組織化學(xué)法檢測的Bax和Bcl-2蛋白在早孕絨毛細(xì)胞中的表達，結(jié)果

4、顯示，對照組中早孕絨毛中促凋亡的Bax蛋白少量分布于合體滋養(yǎng)細(xì)胞胞漿中，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞及間質(zhì)含量極少，而照射組中細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞及合體滋養(yǎng)細(xì)胞中Bax蛋白含量均增加，照射3min及照射.5min組與對照組之間Bax蛋白表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，照射10min組Bax蛋白表達明顯增強，與其他三組比較差異有顯著性(P<0.01)。而抑制凋亡的Bcl-2蛋白表達在照射3min組、照射5min組及照射10min組表達與對照組比較無顯著性差

5、異(P>0.05)。 結(jié)論: 1、早孕絨毛中有少量凋亡細(xì)胞存在，主要分布于合體滋養(yǎng)細(xì)胞，間質(zhì)細(xì)胞分布很少，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞沒有見到凋亡細(xì)胞存在。 2、陰道超聲照射后增加早孕絨毛細(xì)胞的凋亡，而且隨著照射時間的延長，絨毛細(xì)胞的凋亡指數(shù)逐漸升高，以照射10min組的絨毛細(xì)胞凋亡指數(shù)最高，照射3分鐘組細(xì)胞凋亡指數(shù)與對照組無顯著性差異。 3、早孕絨毛細(xì)胞促凋亡的Bax蛋白少量分布于合體滋養(yǎng)細(xì)胞胞漿中，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞及間質(zhì)含量極少