宮清顆粒誘導藥物流產人早孕絨毛、蛻膜細胞凋亡信號轉導的研究.pdf

1、目的:從細胞凋亡信號轉導的角度探討化瘀、益氣養(yǎng)血、清熱中藥宮清顆粒防治藥物流產后異常子宮出血(簡稱藥流后出血)的作用機制,并探討流產藥物抗早孕的機理,豐富中醫(yī)學“產后多虛多瘀”理論的科學內涵,為臨床防治本病提供實驗室生物學依據。方法:研究分現代中醫(yī)文獻研究和臨床研究兩大部分?，F代中醫(yī)文獻研究中,以防治藥流后出血的現代中醫(yī)文獻為研究對象,建立證治方藥數據庫,運用文獻研究和統(tǒng)計學分析相結合的方法,從頻數分析、因子分析、聚類分析角度對本病病因

2、病機及證治規(guī)律進行統(tǒng)計分析。臨床研究中,將180例患者隨機分為宮清藥流組、茜芷藥流組及單純藥流組,并設人工流產組(簡稱人流組)患者60例,在觀察臨床療效的同時,收集各組人早孕絨毛、蛻膜組織,透射電鏡下觀察絨毛及蛻膜組織細胞超微結構變化,并檢測細胞凋亡率(AR)、凋亡信號轉導相關指標凋亡因子Fas信使核糖核酸(FasmRNA)、Fas配體信使核糖核酸(FasLmRNA)、凋亡因子Fas、Fas配體(FasL)、蛋白激酶C(PKC)、細胞內

3、鈣離子濃度([Ca2+]i)表達變化,分析指標間的相關性。結果:現代中醫(yī)文獻研究顯示,瘀、虛、熱是藥流后異常子宮出血的基本病因病機,活血化瘀、益氣養(yǎng)血、清熱是防治本病的基本原則,分析出了防治本病的高頻藥物及其配伍規(guī)律,為以活血化瘀、益氣養(yǎng)血、清熱法為組方原則的宮清顆粒防治本病提供了中醫(yī)文獻學依據。臨床研究發(fā)現:宮清藥流組孕囊排出時間較茜芷藥流組及單純藥流組明顯縮短,均有非常顯著性差異(P<0.01);宮清藥流組子宮出血量明顯減少,與茜芷

4、藥流組比較有顯著性差異(P<0.05),與單純藥流組比較有非常顯著性差異(P<0.01);宮清藥流組子宮出血天數較單純藥流組明顯縮短,有顯著性差異(P<0.05),與茜芷藥流組比較無顯著性差異(P>0.05)。單純藥流組人早孕絨毛及蛻膜組織細胞超微結構觀察發(fā)現細胞凋亡傾向,凋亡信號轉導指標檢測顯示FasmRNA及FasLmRNA基因表達、Fas及FasL蛋白表達、[Ca2+]i明顯升高,PKC蛋白表達明顯降低,與人流組比較有非常顯著性差

5、異(P<0.01)。宮清顆粒的作用趨勢與單純藥流藥物相同,其作用效果較茜芷藥流組與單純藥流組顯著,超微結構觀察發(fā)現宮清藥流組絨毛及蛻膜組織細胞出現典型的凋亡形態(tài)學改變,凋亡信號轉導指標檢測顯示,AR、FasmRNA基因及FasLmRNA基因表達、Fas蛋白及FasL蛋白表達、[Ca2+]i較茜芷藥流組、單純藥流組明顯升高(P<0.05,P<0.01),PKC蛋白表達顯著降低(P<0.05,P<0.01)。宮清藥流組AR與FasmRNA基

6、因、FasLmRNA基因、Fas蛋白、FasL蛋白表達及[Ca2+]i呈正相關,與PKC蛋白表達呈負相關;FasmRNA基因表達與Fas蛋白表達呈正相關,FasLmRNA基因表達與FasL蛋白表達呈正相關,PKC蛋白表達與[Ca2+]i呈負相關。結論:藥流藥物通過影響Fas/FasL、PKC、Ca2+介導的細胞凋亡信號轉導途徑,引起人早孕絨毛滋養(yǎng)細胞及蛻膜細胞凋亡,這可能是其抗早孕的機理之一。細胞凋亡不僅是藥流的啟動因素,同時凋亡障礙也