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文檔簡介
1、LCN-2(lipocalin-2)名為脂質(zhì)運載蛋白2,又名中性粒細(xì)胞白明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白,屬于轉(zhuǎn)運蛋白中親脂性的分泌型糖蛋白,參與動物機體多種生物功能。本研究主要采用原位雜交、免疫印跡、實時熒光定量PCR等方法,并利用發(fā)育性表達(dá)、隱睪、白消安處理等模型,分別檢測LCN-2基因和蛋白在CD-1小鼠睪丸中的表達(dá)與分布情況,探討LCN-2基因與雄性生殖的關(guān)系以及調(diào)節(jié)機制,為進一步的研究LCN-2基因在小鼠生殖發(fā)育過程中的功能提供理論依據(jù)
2、。
發(fā)育性表達(dá)模型中發(fā)現(xiàn)LCN-2基因在小鼠1日齡、10日齡和20日齡中未見表達(dá),30日齡、40日齡、2月齡、4月齡、8月齡、12月齡中有表達(dá),原位雜交結(jié)果顯示在4月齡時表達(dá)量最高。
隱睪模型中睪丸體積變小,HE染色曲細(xì)精管形態(tài)結(jié)構(gòu)損傷,生精上皮和曲細(xì)精管出現(xiàn)不同程度的退化,曲細(xì)精管中只有少量或基本沒有精原細(xì)胞,mRNA表達(dá)量明顯上升,其中大部分在睪丸間質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)(P=0.0378)。WB結(jié)果顯示蛋白水平也是明顯增
3、加(P=0.0005)。
白消安模型中睪丸體積明顯變小,曲細(xì)精管結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞,只剩下一層很薄的生精上皮細(xì)胞,管腔中幾乎沒有精子細(xì)胞。原位雜交結(jié)果顯示,mRNA表達(dá)量明顯上調(diào)(P=0.0232)。WB結(jié)果如同隱睪模型(P=0.0004)。
實時熒光定量PCR結(jié)果顯示隱睪模型和白消安模型中實驗組相比于對照組變化顯著,這也與原位雜交的結(jié)果相吻合。
綜上所述,LCN-2基因在小鼠睪丸中有表達(dá),且在小鼠不同生長發(fā)育階
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