納米銀暴露致雄性小鼠睪丸基因表達(dá)的變化及其對(duì)生殖參數(shù)的影響.pdf

1、納米科技是近年來(lái)不斷膨脹發(fā)展的一個(gè)研究領(lǐng)域，同時(shí)也是一個(gè)具有巨大潛力的經(jīng)濟(jì)領(lǐng)域。納米尺度使得不同的材料具有特殊的物理和化學(xué)性質(zhì)，因此各種類型的納米粒子不僅被用來(lái)制造新型消費(fèi)產(chǎn)品，也被應(yīng)用于生命科學(xué)和生物技術(shù)等各個(gè)方面。納米粒子種類繁多，其中納米銀材料是最具商業(yè)化能力的一種.單價(jià)的銀離子復(fù)合物，特別是硝酸銀被大量應(yīng)用在抗菌治療中，而納米銀粒子同樣保留了此抗菌特性，并被應(yīng)用于制造納米纖維墊子，外傷敷料，軟膏等；此外，因納米銀可防止細(xì)菌在物體

2、表面定植，所以其也被用來(lái)制造導(dǎo)管，假體和服裝等。由此看來(lái)，人類可接觸并暴露于生活中多種來(lái)源的納米銀粒子。目前，盡管含有納米銀的商品越來(lái)越多，但關(guān)于納米銀是否對(duì)人體具有毒性作用，以及是否會(huì)引起細(xì)胞不良反應(yīng)的研究尚缺乏。
　　既往研究中，對(duì)納米銀的毒性研究大多集中在其對(duì)體外細(xì)胞作用的研究，包括對(duì)單核細(xì)胞、生精干細(xì)胞、人類成熟精子、人肺纖維母細(xì)胞、鼠胚胎干細(xì)胞等，而在體內(nèi)的研究較少，目前包括有青春期前納米銀暴露對(duì)成年大鼠生殖功能的研究，

3、以及納米銀暴露對(duì)大鼠肝臟功能的影響，或者通過(guò)吸入法給藥來(lái)研究納米銀對(duì)呼吸系統(tǒng)的影響等，故本實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新性在于通過(guò)對(duì)雄性小鼠進(jìn)行長(zhǎng)期的納米銀暴露，并通過(guò)灌胃法給藥，來(lái)探究其對(duì)雄性生殖系統(tǒng)的毒性作用。
　　目的:研究納米銀對(duì)雄性小鼠生殖系統(tǒng)的毒性作用，并在基因表達(dá)水平上探究其可能的作用機(jī)制。
　　方法:將45只雄性Bal/c小鼠隨機(jī)分為3組，即對(duì)照組（純水），AgNP30mg/kg實(shí)驗(yàn)組，AgNP125mg/kg實(shí)驗(yàn)組，以灌胃法進(jìn)

4、行染毒，每日1次，連續(xù)染毒90日。之后對(duì)小鼠睪丸組織進(jìn)行HE染色并觀察其病理改變，采用ELISA法測(cè)定小鼠血液中生殖激素水平，在顯微鏡下人工觀察并計(jì)數(shù)精子數(shù)量和活力，采用TUNEL法檢測(cè)睪丸組織的細(xì)胞調(diào)亡，通過(guò)微陣列分析及qRT-PCR技術(shù)鑒定各組睪丸中差異性表達(dá)的基因，并在蛋白水平上通過(guò)免疫熒光法和western blotting法對(duì)凋亡相關(guān)基因的表達(dá)進(jìn)行驗(yàn)證。
　　結(jié)果:與對(duì)照組相比，AgNP125mg/kg實(shí)驗(yàn)組小鼠睪丸組織

5、形態(tài)發(fā)生異常改變包括生精細(xì)胞空泡化，支持細(xì)胞減少，生精小管結(jié)構(gòu)異常；精子質(zhì)量下降包括數(shù)量減少和活動(dòng)力減弱；睪丸組織細(xì)胞凋亡增多；但各組間睪丸系數(shù)和血液中性激素水平（FSH/LH/E2/T）并無(wú)明顯差別。對(duì)比分析各組睪丸組織基因表達(dá)譜發(fā)現(xiàn)，125 mg/kg AgNP實(shí)驗(yàn)組中有383個(gè)基因異常表達(dá)，其中215個(gè)基因?yàn)橐阎δ芑?，并且該?shí)驗(yàn)組中凋亡相關(guān)分子Caspase3，Myc和Mdm2的表達(dá)均上調(diào)。
　　結(jié)論：納米銀可能是通過(guò)改