CD63基因在小鼠圍著床期子宮中的表達和調節(jié).pdf

1、胚胎著床是一個復雜的過程，需要活化的胚泡與進入接受態(tài)的子宮內膜之間建立聯系。在嚙齒類動物，著床過程啟動后，子宮內膜基質細胞發(fā)生廣泛的蛻膜化，為接下來的胚胎及胎盤發(fā)育做準備。胚胎著床和子宮蛻膜化受到很多因素調控，但具體的分子機理仍不清楚。我們實驗室利用基因表達系列分析(SAGE)技術發(fā)現，與非著床位點相比，CD63(CD63 antigen)基因在小鼠的著床位點顯著上調。 CD63屬于四次跨膜蛋白超家族，在人黑色素瘤等多種腫瘤發(fā)展

2、中起重要作用，被稱為腫瘤轉移抑制因子。本實驗利用原位雜交、實時定量RT-PCR、Westernblot和熒光素酶活性分析等方法，研究了CD63基因在圍著床期小鼠子宮中的表達與調節(jié)。CD63的mRNA和蛋白水平在妊娠第5天子宮的著床位點均顯著上調，在隨后第6-8天的蛻膜區(qū)，均可檢測到明顯的CD63 mRNA表達信號。在假孕和延遲著床的子宮中，檢測不到CD63基因的表達，而在延遲激活子宮的著床位點，CD63基因的表達特異性增強，其表達模式與

3、正常妊娠第5天著床位點處類似。CD63 mRNA在小鼠妊娠第6-8天的蛻膜區(qū)表達，同時在人工誘導蛻膜化的小鼠子宮中也能檢測到CD63基因的雜交信號，實時定量RT-PCR也驗證了此結果，提示CD63基因可能在蛻膜化過程發(fā)揮作用。在切除卵巢的小鼠中，類固醇激素對CD63在子宮內的表達沒有影響。體外誘導蛻膜化中，CD63 mRNA表達持續(xù)上調。CD63基因啟動子上存在轉錄因子C/EBPβ反應元件，將含有CD63基因啟動子序列的報告載體轉染體外