4-1BB分子在小鼠樹突狀細(xì)胞上的表達(dá)及作用研究.pdf

1、樹突狀細(xì)胞(DCs)是目前所知體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞(APCs)，其特點(diǎn)是能夠顯著刺激初始T細(xì)胞增殖。作為機(jī)體免疫應(yīng)答的始動(dòng)者，DCs在免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)中具有獨(dú)特的地位。未成熟DCs能攝取抗原并將其處理成免疫原性多肽，以MHC分子-抗原肽復(fù)合物的形式表達(dá)于細(xì)胞表面，供抗原特異性T細(xì)胞受體(TCR)識(shí)別。在這過程中未成熟DCs逐漸發(fā)育成熟。成熟DCs與T細(xì)胞之間通過共刺激分子受體與配體間的相互作用激活抗原特異性T細(xì)胞，啟動(dòng)免疫應(yīng)答。

2、 DCs在攝取抗原或接受到某些刺激因素(主要是炎性信號(hào)如LPS、IL-1、TNF-α)后，可以分化成熟，其MHC分子、共刺激分子、粘附分子的表達(dá)顯著提高，激發(fā)T細(xì)胞的能力得到增強(qiáng)，但其抗原攝取加工能力大大降低。 4-1BB與其配體4-1BBL是一對(duì)重要的共刺激分子，對(duì)于活化T細(xì)胞，參與T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答具有重要意義。4-1BB為TNFR超家族成員，表達(dá)于T細(xì)胞、NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞和DCs等細(xì)胞表面，4-1BBL表達(dá)在B細(xì)

3、胞、T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和DCs等細(xì)胞上。4-1BB和4-1BBL在DCs上的共表達(dá)及它們對(duì)于DCs功能的影響正日益受到人們的關(guān)注。 第一部分采用小鼠髓系樹突狀細(xì)胞(BMDCs)開展研究。首先證實(shí)了BMDCs表面共表達(dá)功能性4-1BB及4-1BBL，進(jìn)而研究了TNF-α、LPS、IFNγ、CD40配體(CD40L)等成熟活化因子刺激48h后，BMDCs上4-1BB和4-1BBL的表達(dá)變化。結(jié)果表明，各成熟活化因子均能顯著上調(diào)BMDC

4、s上4-1BB和4-1BBL的表達(dá)，并能有效拮抗負(fù)性調(diào)控因子IL-10下調(diào)DCs上4-1BB和4-1BBL表達(dá)的作用。 第二部分研究了激發(fā)型4-1BB單克隆抗體2A對(duì)BMDCs及小鼠DC細(xì)胞系(DC2.4)成熟活化的影響。結(jié)果顯示，2A刺激BMDCs48h后，細(xì)胞表現(xiàn)出成熟DCs的表型和功能特征，即共刺激分子CD40、CD80、CD86上調(diào)表達(dá)；攝取Dextran能力下降；促T細(xì)胞增殖效應(yīng)顯著增強(qiáng)；分泌IL-12p70明顯增加，

5、以上均提示2A能誘導(dǎo)BMDCs的成熟。同時(shí)，2A還能有效拮抗IL-10對(duì)BMDCs成熟的負(fù)性調(diào)控作用。在DC2.4細(xì)胞上也得到了一致的結(jié)果。此外，與TNF-α和激發(fā)型大鼠抗小鼠CD40單抗1C1O的作用比較后發(fā)現(xiàn)，對(duì)于BMDCs的共刺激分子表達(dá)、吞噬能力和分泌IL-12，2A與lCl0之間無明顯差異(P＞0.05)，而顯著高于TNF-α(P＜0.05)。在對(duì)BMDCs促T細(xì)胞增殖研究中發(fā)現(xiàn)，2A與TNF-α的作用相似(P＞0.05)；而

6、lCl0的作用更顯著(P＜0.05)。在DC2.4細(xì)胞上，2A對(duì)其表面分子表達(dá)、吞噬能力、促T細(xì)胞增殖及分泌IL-12功能的影響與1C1O相比，無明顯差異(P＞0.05)；而強(qiáng)于TNF-α(P＜0.05)。 鑒于DCs上4-1BB和4-1BBL的共表達(dá)及4-1BB信號(hào)對(duì)DCs成熟活化的促進(jìn)作用，推測(cè)DCs在不需要T細(xì)胞上共刺激分子輔助的條件下，僅依賴DC-DC間的相互作用就可能自發(fā)成熟。這將加深人們對(duì)共刺激分子在免疫應(yīng)答中作用的