中國人群中TRAF6基因結構變異的鑒定及其與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的相關性分析.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡作為自身免疫病的原型，免疫異常表型非常豐富，基本涉及到整個免疫系統(tǒng)的紊亂，但其發(fā)病機制明顯依賴于Ⅰ型干擾素（主要是IFN-α）的大量產(chǎn)生，即Ⅰ型干擾素為狼瘡的核心致病因素。Ⅰ-IFN的產(chǎn)生主要通過兩種途徑，即Toll樣受體（TLR）依賴的途徑和TLR非依賴途徑，其中TLR依賴的途徑起主要作用，這兩種通路均有賴于腫瘤壞死因子受體相關因子6（TNF receptor-associated factor6,TRAF6）這一重要的

2、信號轉導分子的信號傳遞作用。 我們先利用實時熒光定量PCR方法檢測SLE患者外周血TRAF6基因的表達水平以及各種亞型的表達情況，結果發(fā)現(xiàn)SLE中總的TRAF6 mRNA水平及a、c兩種剪接體均顯著高于正常對照組，然而SLE患者PBMC中TRAF6a剪接體占TRAF6總mRNA的比例明顯高于正常對照組，而SLE患者中c剪接體占總mRNA的比例卻明顯低于正常對照組，而且TRAF6a mRNA水平與TRAF6c的比值在SLE患者組中

3、亦明顯高于正常對照組，差異均有統(tǒng)計學意義。這說明SLE患者PBMC中TRAF6明顯高表達，而其中又主要是TRAF6a剪接體表達水平明顯升高。因此推測，SLE中TRAF6的表達上調(diào)主要在Ⅰ型干擾素通路的異常活化中起一定作用，因而間接參與了疾病的發(fā)病過程，而其中又主要是TRAF6a剪接體的作用。 分析發(fā)現(xiàn)，TRAF6a、c兩種剪接體的表達水平均與反映Ⅰ型干擾素通路活化程度的指標——干擾素積分明顯呈正相關趨勢，而僅有a剪接體表達量與評

4、估狼瘡疾病活動程度的指標——SLEDAI積分明顯呈正相關趨勢，提示SLE體內(nèi)TRAF6兩種剪接體的高表達均參與了Ⅰ型干擾素通路的異常活化，但僅有a剪接體表達水平與疾病活動程度呈正相關。 通過對TRAF6基因重點區(qū)域測序發(fā)現(xiàn)，有4處SNP信息未包含在HAP MAP數(shù)據(jù)庫中,連鎖分析發(fā)現(xiàn)rs5030414和與其相距0.4kb處的rs5030416存在強連鎖，因而補充了HAPMAP數(shù)據(jù)庫的單倍型信息。但基因分型的病例-對照分析未發(fā)現(xiàn)與

5、SLE易感性明顯相關的SNP，因此，認為中國人群中TRAF6基因內(nèi)部不存在狼瘡易感性變異。 另外，通過比較分析TRAF6基因標簽SNP的基因型與相應的TRAF6a mRNA表達水平的關系，發(fā)現(xiàn)兩者無明顯關聯(lián)，p值均大于0.05，即這些SNP與SLE患者外周血單核細胞中TRAF6a mRNA表達水平的升高無關聯(lián)，初步認為TRAF6內(nèi)部的SNP不影響SLE患者外周血單核細胞中TRAF6a mRNA的表達情況，而且TRAF6a、c兩種