雷公藤甲素對BABL-c哮喘小鼠氣道重塑的影響.pdf

1、背景： 支氣管哮喘(簡稱哮喘)是由多種細胞(嗜酸性粒細胞、肥大細胞、T淋巴細胞、中性粒細胞、氣道上皮細胞等)和細胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾患。2006年版全球哮喘防治創(chuàng)議指出：哮喘的患病率和死亡率在世界范圍內(nèi)均呈明顯上升的趨勢。全球約有三億患者，我國至少有1500萬。哮喘已經(jīng)成為一個嚴(yán)重的世界性社會公共衛(wèi)生問題。這種慢性炎癥導(dǎo)致氣道高反應(yīng)性，通常出現(xiàn)廣泛多變的可逆性氣流受限，并引起反復(fù)發(fā)作性的喘息、氣急、胸悶或咳嗽等癥狀，常在

2、夜間和(或)清晨發(fā)作、加劇，多數(shù)患者可自行緩解或經(jīng)治療緩解。 氣道慢性炎癥所引發(fā)的氣道反復(fù)損傷、修復(fù)，可導(dǎo)致氣道結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，稱為氣道重塑，其特點包括氣道壁增厚，上皮下纖維化，粘液化生，成纖維細胞增生，肌細胞增生和肥大，上皮增生和血管改變?nèi)缪芡ㄍ感栽黾雍托卵苌?。氣道重塑可能?dǎo)致氣道高反應(yīng)性和可逆性或不可逆性氣流阻塞。 雷公藤甲素由于其抗炎及免疫調(diào)節(jié)雙重功效在很多自身免疫性疾病中發(fā)揮作用。本課題研究探討雷公藤甲素對B

3、ABL/c哮喘小鼠氣道重塑的影響。 目的： 1、探討雷公藤甲素對支氣管哮喘(簡稱哮喘)小鼠氣道重塑的影響及其機制。 2、對比雷公藤甲素和地塞米松對支氣管哮喘小鼠氣道重塑的影響。 方法： 40只雌性SPF級BABL/c小鼠，隨機數(shù)字表法分為4組，每組10只。A組為生理鹽水對照組；B組為卵蛋白(OVA)哮喘組；C組為雷公藤甲素治療組；D組為地塞米松治療組。在末次激發(fā)24小時后所有小鼠取左肺組織行蘇木精

4、—伊紅(HE)染色，過碘酸—雪夫(PAS)染色，Masson三色染色以及抗轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF—β1)抗體免疫組化染色。測定支氣管管壁厚度(WAt/Pbm)，支氣管平滑肌厚度(WAm/Pbm)。取右肺組織行RT—PCR檢測TGF—β1mRNA表達。 統(tǒng)計學(xué)方法： 實驗數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析，各組數(shù)據(jù)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差表示。組間樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析(One—Way ANOVA)，方差分析先行方差

5、齊性檢驗，方差不齊進行平方根轉(zhuǎn)換，用LSD—t法進行兩兩比較。P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.01即差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： B組小鼠支氣管管壁厚度、杯狀細胞百分?jǐn)?shù)、氣道平滑肌厚度、膠原纖維面積、TGF—β1的轉(zhuǎn)錄和表達水平均顯著高于A組[(17.86±1.22)μm2/μm vs(10.80±1.20)μm2/μm，(41.70±1.67)％vs(1.97±0.16)％,(6.34±0.66)μm2/μm

6、 vs(3.35±0.34)μm2/μm，(21.66±3.34)μm2/μm vs(4.03±0.73)μm2/μm,(0.70±0.09) vs(0.14±0.07),(0.32±0.01)vs(0.08±0.01)，P均<0.01]。C組小鼠上述各指標(biāo)依次均顯著低于B組[(12.61±1.17)μm2/μm vs(17.86±1.22)μm2/μm，(24.08±1.29)％vs(41.70±1.67)％，(4.83±0.46)μ

7、m2/μm vs(6.34±0.66)μm2/μm，(13.61±1.16)μ㎡/μm vs(21.66±3.34)μ㎡/μm，(0.43±0.08)vs(0.70±0.09)，(0.11±0.01)vs(0.13±0.01),P均<0.05],D組小鼠上述指標(biāo)顯著低于B組[(13.0±1.30)μ㎡/μm vs(17.86±1.22)μ㎡/μm，(23.72±1.10)％vs(41.70±1.67)％，(4.85±0.38)μ㎡/μm

8、 vs(6.34±0.66)μ㎡/μm,(13.08±0.68)μ㎡/μm vs(21.66±3.34)μ㎡/μm，(0.43±0.06)vs(0.70±0.09),(0.11±0.01)vs(0.13±0.01)，P均<0.05]。但C組和D組上述各指標(biāo)間差異無顯著性[(12.61±1.17)μ㎡/μm vs(13.0±1.30)μ㎡/μm,(24.08±1.29)％vs(23.72±1.10)％,(4.83±0.46)μ㎡/μm v

9、s(4.85±0.38)μ㎡/μm,(13.61±1.16)μ㎡/μm vs(13.08±0.68)μ㎡/μm,(0.43±0.08)vs(0.43±0.06)，(0.11±0.01)vs(0.11±0.01)，p均>0.05]。肺組織的TGF—β1的蛋白表達水平與支氣管的管壁厚度，平滑肌厚度，杯狀細胞比，膠原纖維含量成正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)分別為0.755、0.815、0.898、0.837；P<0.01)。 結(jié)論： 1、雷