顱骨骨折在腦外傷促新骨形成過程中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、臨床工作中發(fā)現(xiàn)伴有腦外傷的骨折病人，其骨痂生長明顯增多加快，甚至在某些關(guān)節(jié)周圍出現(xiàn)異位骨化。關(guān)于此現(xiàn)象國內(nèi)外均有臨床報(bào)道和基礎(chǔ)研究，提出了很多假說，但其中機(jī)制迄今仍不明朗。目前提出的機(jī)制多數(shù)是針對(duì)腦外傷后是否會(huì)導(dǎo)致腦組織內(nèi)某些成份釋放入血液系統(tǒng)促進(jìn)新骨形成，但沒有關(guān)于顱骨骨折是否會(huì)引起顱骨中的某些成分進(jìn)入血液系統(tǒng)促進(jìn)新骨形成的研究和報(bào)道。 目的： 探討顱骨骨折在腦外傷促新骨形成過程中的作用；研究顱骨骨折伴股骨骨折組大鼠血

2、漿對(duì)骨髓間質(zhì)細(xì)胞的作用；研究顱骨移植對(duì)骨折愈合的影響作用；研究IGFBP-5在顱骨組織中的表達(dá)情況，及其對(duì)骨髓間質(zhì)細(xì)胞的作用。 方法： 研究分以下幾個(gè)部分進(jìn)行： 1．建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，比較顱骨骨折伴股骨骨折、腦外傷伴股骨骨折及單純股骨骨折后骨折愈合的情況。 2．進(jìn)行大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、純化及鑒定。 3．比較顱骨骨折組血漿、腦外傷組血漿及單純骨折組血漿對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)細(xì)胞增殖、分化及礦

3、化功能的影響；比較顱骨浸泡液、髂骨浸泡液對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)細(xì)胞增殖、分化及礦化功能的影響。 4．研究IGFBP-5在顱骨、髂骨及股骨中的表達(dá)，比較不同濃度IGFBP-5對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)細(xì)胞增殖、分化及礦化功能的影響；去除腦外傷組血漿中的IGFBP-5，比較其與未處理腦外傷組血漿對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)細(xì)胞增殖、分化及礦化功能的影響。 結(jié)果： 1．通過建立腦外傷、顱骨骨折及股骨骨折動(dòng)物模型，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示術(shù)后4周顱骨骨折組生成

4、骨痂體積比單純骨折組骨痂大(P＜0.05)，但小于腦外傷組(P＜0.05)；骨折斷端骨密度檢測(cè)結(jié)果顯示顱骨骨折組與顱腦損傷組無明顯差異(P＞0.05)，但兩組都低于單純骨折組(P＜0.05)；組織形態(tài)學(xué)HE染色顯示顱骨骨折組與腦外傷組類似，但不同與單純骨折組。 2．采用密度梯度離心法和貼壁篩選法相結(jié)合，利用Ficoll分離液能有效地將大部分造血細(xì)胞和單個(gè)核細(xì)胞分離開來，再經(jīng)過體外貼壁培養(yǎng)，去除懸浮生長的造血系細(xì)胞，所獲得的BMS

5、Cs純度高且活性強(qiáng)。 3．顱骨移植組骨痂體積明顯大于髂骨移植(P＜0.05)和單純骨折組(P＜0.05)。骨折斷端骨密度檢測(cè)結(jié)果顯示顱骨移植組低于單純骨折組及髂骨移植組(P＜0.05)；組織形態(tài)學(xué)HE染色顯示顱骨移植組不同于髂骨移植組和單純骨折組； CBF+F血漿組細(xì)胞在增殖、向成骨細(xì)胞分化及促進(jìn)鈣結(jié)節(jié)生成能力均較F組血漿培養(yǎng)組強(qiáng)，二者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，但較TBI+F動(dòng)物血漿培養(yǎng)組數(shù)量差，二者比較有統(tǒng)計(jì)

6、學(xué)差異(P＜0.05)；顱骨浸泡液在增殖、向成骨細(xì)胞分化及促進(jìn)鈣結(jié)節(jié)生成能力三方面均較髂骨浸泡液強(qiáng)(P＜0.05)。 4．各骨折組動(dòng)物模型血漿中IGFBP-5濃度于骨折后第8小時(shí)達(dá)到高峰，此后逐漸減低，至術(shù)后第5天時(shí)，各組血漿IGFBP-5濃度與正常組血漿無差別。骨折后8小時(shí)CBF+F組血漿IGFBP-5濃度是單純骨折組血漿IGFBP-5濃度的2.83倍，是正常大鼠血漿IGFBP-5濃度的3.12倍。 結(jié)論： 1