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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:臨床發(fā)現(xiàn):骨折病人若同時(shí)伴有腦外傷,骨痂比單純病人骨折生長(zhǎng)快、數(shù)量多,甚至出現(xiàn)異位骨化現(xiàn)象。似乎腦損傷會(huì)加速骨折愈合。關(guān)于此現(xiàn)象國(guó)內(nèi)外均有臨床報(bào)道和少量基礎(chǔ)研究,提出了不少假設(shè),但其中機(jī)制迄今仍不是十分明確。有臨床試驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)腦外傷合并骨折患者傷后血清神經(jīng)生長(zhǎng)因子(nerve growth factor,NGF)、血小板衍生生長(zhǎng)因子(platelet-derived growth factor,PDGF)水平顯著高于單純骨折患者,
2、提示腦外傷后NGF、PDGF含量顯著增加,是加速骨折愈合的生長(zhǎng)因子,在腦外傷后骨折愈合過(guò)程中起到促進(jìn)作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)單純骨折患者和骨折合并腦外傷患者局部骨痂中NGF、PDGF的含量,在統(tǒng)計(jì)學(xué)上是否存在差異,尋找在骨折愈合中的關(guān)鍵因子,為臨床應(yīng)用提供資料。
方法:
1.入選標(biāo)準(zhǔn):(1)男女不限,年齡14~55,無(wú)基礎(chǔ)疾病。(2)骨折部位:四肢長(zhǎng)骨。(3)診斷標(biāo)準(zhǔn):X光片測(cè)定骨折部位;CT確定腦外傷性質(zhì)及部位
3、。(4)治療方法:局部外固定。
2.樣本采集:患者傷后骨折部外固定,在患者情況允許手術(shù)治療情況下,取患者骨折處骨痂(取標(biāo)本時(shí)是患者受傷7天到4周之間),所取標(biāo)本立即置入4%多聚甲醛保存,并標(biāo)號(hào)。取標(biāo)本15例,分為單純骨折組5例和骨折合并腦外傷組10例。
3.含量測(cè)定:所留取的標(biāo)本采用HE染色進(jìn)行組織學(xué)觀察,及免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)骨折局部NGF、PDGF的表達(dá)。
4.圖像分析:使用多功能真彩色細(xì)
4、胞圖象分析管理系統(tǒng)對(duì)所有標(biāo)本切片進(jìn)行分析,最后將所得數(shù)據(jù)采用SPSS17.0版統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
結(jié)果:
1.HE染色
1.1單純骨折組,骨痂內(nèi)可見(jiàn)到大量肉芽組織生長(zhǎng),大量增生的結(jié)締組織和毛細(xì)血管,可見(jiàn)大量成纖維細(xì)胞及分泌的膠原纖維,可見(jiàn)有軟骨細(xì)胞,未見(jiàn)新生骨小梁形成。
1.2骨折合并腦外傷組,骨痂內(nèi)可見(jiàn)肉芽組織形成;增生的結(jié)締組織和毛細(xì)血管,及軟骨形成;可見(jiàn)新生骨小梁形成;
5、未見(jiàn)骨小梁連續(xù)及編織骨形成,可見(jiàn)有大量成骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞。
2.免疫組織化學(xué)染色
2.1單純骨折的骨痂內(nèi)可見(jiàn)PDGF、NGF在增生的結(jié)締組織區(qū)域及軟骨細(xì)胞團(tuán)周?chē)鷧^(qū)域略有所表達(dá),可見(jiàn)PDGF、NGF在成纖維細(xì)胞、成骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞有少許表達(dá),在增生的組織中有所表達(dá),但不是特別明顯。在新生的軟骨細(xì)胞團(tuán)區(qū)表達(dá)不明顯。
2.2骨折合并腦外傷的骨痂內(nèi)可見(jiàn)PDGF、NGF在增生的結(jié)締組織區(qū)域、新生的骨小梁周
6、圍區(qū)域及軟骨組織周?chē)鷧^(qū)域表達(dá)明顯,在新生的軟骨組織區(qū)表達(dá)不明顯??梢?jiàn)PDGF、NGF在骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞和纖維母細(xì)胞和新形成的骨基質(zhì)均呈陽(yáng)性染色,而軟骨細(xì)胞表達(dá)效果不好。
3.統(tǒng)計(jì)分析:
3.1單純骨折組和骨折合并腦外傷組取痂時(shí)間沒(méi)有差異(p>0.05)。
3.2單純骨折組和骨折合并腦外傷組之間PDGF免疫組化評(píng)分比較,骨折合并腦外傷組骨痂中PDGF免疫組化評(píng)分明顯較單純骨折組高(p<0.01)
7、。
3.3骨折合并腦外傷組骨痂內(nèi)NGF免疫組化評(píng)分比單純骨折組骨痂內(nèi)NGF免疫組化評(píng)分較高(p<0.05)。
3.4骨痂中PDGF的表達(dá)增弱與患者的年齡不相關(guān)(r=0.194,p>0.05)。骨痂中NGF的表達(dá)增弱與患者的年齡不相關(guān)(r=0.185,0>0.05)。
3.5骨痂中PDGF免疫組化表達(dá)較NGF免疫組化表達(dá)顯著增高(p<0.01)。
結(jié)論:
1.證實(shí)了PD
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