參蘇飲對(duì)肺氣虛外感小鼠肺組織β-防御素-2的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　研究參蘇飲對(duì)“肺氣虛外感”小鼠肺組織β-防御素-2表達(dá)與TLR4/NF-κB信號(hào)通路的相關(guān)性。
　　方法：
　　1.以“煙熏聯(lián)合氣管注射LPS”的方法復(fù)制“肺氣虛外感”小鼠模型，測(cè)定模型小鼠的一般狀況、體重、肺指數(shù)、脾指數(shù)、胸腺指數(shù)的變化，并結(jié)合肺部病理組織形態(tài)學(xué)變化，判定模型的成功復(fù)制；
　　2.“酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)”測(cè)定參蘇飲對(duì)“肺氣虛外感”小鼠肺泡灌洗液BD-2含量的影響；
　

2、　3.“免疫組化（SP法）”測(cè)定參蘇飲對(duì)“肺氣虛外感”小鼠肺組織 TLR4、NF-κBp65、BD-2蛋白表達(dá)的影響；
　　4.“實(shí)時(shí)熒光定量 PCR（qRT-PCR）”測(cè)定參蘇飲對(duì)“肺氣虛外感”小鼠肺組織 TLR4、NF-κBp65、BD-2mRNA表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：
　　1.“煙熏聯(lián)合氣管注射LPS”對(duì)小鼠一般狀況、體重、肺指數(shù)、脾指數(shù)、胸腺指數(shù)的影響煙熏后動(dòng)物活動(dòng)逐漸減少、皮毛無光澤、松散發(fā)黃、精神萎靡、拉

3、稀樣便；肺臟病理組織學(xué)檢測(cè)顯示：空白組小鼠肺臟層胸膜無結(jié)締組織增生、增厚、無結(jié)構(gòu)性破壞，支氣管無炎癥表現(xiàn)；模型組肺臟層胸膜結(jié)締組織增生、增厚，肺小支氣管及血管周圍可見炎細(xì)胞圍管浸潤(rùn)，肺間質(zhì)輕度炎癥。模型組動(dòng)物體重增長(zhǎng)緩慢，煙熏15天后與空白組相比有顯著差異（p<0.01）；20天造模完成后模型組肺、脾、胸腺重量與空白組相比有顯著差異（p<0.05）。
　　2.參蘇飲對(duì)“肺氣虛外感”證小鼠肺泡灌洗液BD-2含量的影響與空白組比較，各

4、組肺泡灌洗液中BD-2含量均顯著升高（P<0.05）；與模型組相比，全方組肺泡灌洗液中BD-2含量均顯著下降（P<0.05），益氣解表組、止咳化痰組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　3.參蘇飲對(duì)“肺氣虛外感”小鼠肺組織TLR4、NF-κBp65、BD-2蛋白表達(dá)的影響與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠肺組織中NF-κB p65、BD-2、TLR4蛋白的含量均顯著升高（P<0.05）；與模型組比較，全方組、益氣解表組、止咳化痰組小鼠

5、肺組織中NFκB p65、BD-2、TLR4蛋白的含量均顯著地下降（P<0.05）；全方組、益氣解表組、止咳化痰組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　4.參蘇飲對(duì)“肺氣虛外感”小鼠肺組織 TLR4、NF-κBp65、BD-2mRNA表達(dá)的影響與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠肺組織中NF-κB p65 mRNA、BD-2 mRNA、TLR4 mRNA的含量均顯著升高（P<0.05）；與模型組比較，全方組、益氣解表組、止咳化痰組小鼠肺