高氧致新生大鼠肺損傷T淋巴細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化的研究.pdf

1、目的： 探討高氧致新生大鼠肺損傷過(guò)程中脾臟及胸腺中T淋巴細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化。 方法： 72只出生12小時(shí)內(nèi)的清潔級(jí)Sprague-Dawley(S-D)大鼠(簡(jiǎn)稱(chēng)新生大鼠)作為研究對(duì)象。隨機(jī)分為2組：Ⅰ、空氣對(duì)照組，Ⅱ、高氧暴露組，每組36只。Ⅰ組置于正?？諝庵形桂B(yǎng)，Ⅱ組置于80-85％氧濃度下喂養(yǎng)。分別于第1、4、7、14、21天時(shí)，以常規(guī)組織學(xué)方法觀察肺臟形態(tài)結(jié)構(gòu)變化；運(yùn)用常規(guī)計(jì)數(shù)法檢測(cè)脾臟中淋巴細(xì)胞數(shù)量變化；采

2、用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)脾臟中CD4+、CD8+T細(xì)胞的百分比的變化；以混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MTT法)檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞對(duì)植物血凝素和自身肺組織的增殖反應(yīng)；用常規(guī)組織學(xué)和免疫組化法觀察胸腺形態(tài)結(jié)構(gòu)變化及增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)和CD4+、CD8+細(xì)胞分布。 結(jié)果： 1.肺臟組織學(xué)變化：與空氣對(duì)照組相比，高氧組4d時(shí)肺組織充血、水腫；7d時(shí)肺組織出血、水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯；14d時(shí)炎癥反應(yīng)減輕，肺間質(zhì)增寬，纖維增生；21d肺泡數(shù)

3、量減少，肺間質(zhì)纖維細(xì)胞增生，肺泡節(jié)段性高充氣與膨脹不全交替，形成特征性囊泡樣改變。 2.脾組織中淋巴細(xì)胞數(shù)量與活性變化：實(shí)驗(yàn)4d時(shí)，高氧組脾臟中淋巴細(xì)胞數(shù)量開(kāi)始增多，CD4+、CD8+淋巴細(xì)胞百分比較對(duì)照組明顯增多(p<0.01)，至實(shí)驗(yàn)7d時(shí)，CD4+淋巴細(xì)胞百分比明顯高于對(duì)照組(p<0.01)，此后CD4+、CD8+淋巴細(xì)胞百分比逐漸下降，到實(shí)驗(yàn)21d時(shí)CD4+、CD8+淋巴細(xì)胞百分比接近對(duì)照組，而絕對(duì)數(shù)明顯低于對(duì)照組(p值

4、均<0.01)；此外，淋巴細(xì)胞活性檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)4d至7d時(shí)，脾淋巴細(xì)胞對(duì)自身肺組織和對(duì)PHA刺激的增殖反應(yīng)活性較對(duì)照組均明顯增高(p值均<0.01)；實(shí)驗(yàn)14d至21d時(shí)，脾淋巴細(xì)胞對(duì)自身肺組織刺激的增殖反應(yīng)活性逐漸下降，但均明顯高于對(duì)照組(p值均<0.01)，而對(duì)PHA刺激后的增殖反應(yīng)活性均明顯低于對(duì)照組(p值均<0.01)。 3.胸腺組織學(xué)變化：與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)4d至7d時(shí)，高氧組胸腺指數(shù)逐漸升高，PCNA表達(dá)逐漸增強(qiáng)，

5、兩組間差異均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p值均<0.01)：但實(shí)驗(yàn)14d至21d時(shí)，高氧組胸腺指數(shù)、PCNA指數(shù)逐漸下降，其中PCNA指數(shù)在21d時(shí)已明顯低于對(duì)照組(p<0.01)，形態(tài)學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)高氧組胸腺蜷曲退化，脂肪細(xì)胞及纖維細(xì)胞增生，免疫組化顯示CD4+、CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量減少且呈區(qū)域性分布。 結(jié)論： 1.80-85％高氧持續(xù)暴露21d可造成新生大鼠高氧性肺損傷，病理表現(xiàn)主要為肺泡節(jié)段性高充氣和與膨脹不全交替的囊泡樣改變

6、等，與新生兒慢性肺損傷的病理改變相符。 2.高氧性肺損傷早期脾臟中CD4+、CD8+淋巴細(xì)胞百分比明顯增高、活性逐漸增強(qiáng)，后期脾臟CD4+、CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量明顯減少，淋巴細(xì)胞活性顯著減低。 3.高氧性肺損傷可導(dǎo)致新生大鼠的胸腺發(fā)生階段性病理改變，即病理性成熟加速迅速轉(zhuǎn)變?yōu)椴±硇晕s，表現(xiàn)為CD4+、CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量明顯減少并呈異常的點(diǎn)狀局限性和區(qū)域性分布。 4.高氧性肺損傷過(guò)程中有自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞的參