脊髓損傷SD大鼠外周血和損傷局部CD8+T淋巴細(xì)胞亞群的變化.pdf

1、背景：脊髓損傷后的免疫反應(yīng)過程十分復(fù)雜，許多免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子參與其中，這些細(xì)胞和因子共同決定著脊髓損傷后的恢復(fù)過程。目前為止，對(duì)于脊髓損傷后CD8+T淋巴細(xì)胞亞群的作用還不清楚。了解這些細(xì)胞亞群在脊髓損傷后的變化有利于明確其免疫機(jī)制，為脊髓損傷的治療提供科學(xué)參考。
　　目的：探討脊髓損傷SD大鼠外周血和損傷局部CD8+T淋巴細(xì)胞亞群的變化規(guī)律。
　　方法：采用紐約大學(xué)脊髓損傷儀制備脊髓損傷大鼠模型，在損傷前后的不同時(shí)間點(diǎn)，

2、從尾部采集血液和用密度梯度離心方法分離損傷局部單個(gè)核細(xì)胞；運(yùn)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)脊髓損傷SD大鼠外周血和損傷局部T淋巴細(xì)胞亞群。
　　結(jié)果：⑴脊髓損傷前SD大鼠即正常SD大鼠外周血中總T細(xì)胞占淋巴細(xì)胞的百分比為59.71±3.24。脊髓損傷1d，其百分比為46.89±4.44，是所有試驗(yàn)觀察點(diǎn)中最低值。3d時(shí)其比例回升，達(dá)53.44±3.97，但仍處于較低水平，與1d比較無顯著性差異（P>0.05）。5d后其比例恢復(fù)到正常水平，并一

3、直維持到損傷后的第21天。脊髓損傷后28d和56d，其百分比分別為69.30±2.28和70.27±2.64。兩者之間無顯著性差異（P>0.05），但與其他時(shí)間點(diǎn)比較，28d的結(jié)果較其前的所有觀察點(diǎn)結(jié)果增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而56d的結(jié)果僅和正常SD大鼠，脊髓損傷1d、3d、14d、21d比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑵脊髓損傷前CD3+CD8+T細(xì)胞占CD3+T細(xì)胞的百分比為45.02±3.82，脊髓損傷后1

4、d下降，為39.86±3.89，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但是3d后，其值又恢復(fù)到損傷前正常大鼠水平，28d其值達(dá)到高峰，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑶SD大鼠脊髓損傷前外周血CD3+CD8+CD28-和CD3+CD8+CD28+占CD3+CD8+T細(xì)胞的百分比分別為65.43±4.07和34.57±4.07。損傷后 CD3+CD8+CD28-和CD3+CD8+CD28+的變化趨勢(shì)正好相反。損傷后1d，3d，7d，14d，

5、28d和56d，與損傷前比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。損傷后5d，CD3+CD8+CD28-百分比降為49.50±4.82，為所有觀察時(shí)間點(diǎn)中的最低值，而CD3+CD8+CD28+百分比則升為50.50±4.82，為所有觀察時(shí)間點(diǎn)中的最高值，和損傷前、損傷后3d，7d，14d，28d，56d比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。損傷28d時(shí)，CD3+CD8+CD28-的比例較損傷后1d，3d，5d，14d，21d增高，差異有

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，損傷后56d的百分比較損傷前，損傷后1d，3d，5d，21d增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而損傷28d后，CD3+CD8+CD28+的比例較損傷后1d，3d，5d，14d，21d降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，損傷后56d的百分比較損傷前，損傷后1d，3d，5d，21d降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑷脊髓損傷后1d，浸潤(rùn)到損傷局部的CD3+CD8+T細(xì)胞占CD3+T細(xì)胞的百分比為4

7、0.55±1.59。損傷后3d，5d，7d，14d，28d其比例分別為38.84±4.71、47.57±15.79、50.07±1.97、37.70±8.85、55.14±5.56和44.78±3.26，和損傷后1d比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。脊髓損傷后56d，其值升高，為70.85±7.16，和脊髓損傷后1d，3d，5d，14d，28d比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑸脊髓損傷后1d，損傷局部浸潤(rùn) CD3+CD8

8、+CD28-和 CD3+CD8+CD28+占CD3+CD8+的百分比分別為為69.87±6.00和30.13±6.00，損傷后1d，3d，5d的百分比兩兩比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。脊髓損傷后7d， CD3+CD8+CD28-結(jié)果為95.81±0.90，是所有觀察點(diǎn)的峰值， CD3+CD8+CD28+出現(xiàn)下降，結(jié)果為4.19±0.90，是所有觀察點(diǎn)的最低值，和損傷后1d，3d，5d比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

9、之后，CD3+CD8+CD28-一直維持在較高水平，結(jié)果分別為：14d為92.52±1.00，21d為89.49±3.40，28d為88.44±4.10，56d為95.11±0.40，CD3+CD8+CD28+一直維持在較低水平，結(jié)果分別為：14d為7.48±1.00，21d為10.51±3.40，28d為11.56±4.10，56d為4.89±0.40。此四個(gè)觀察點(diǎn)分別和7d相同，和損傷后1d，3d，5d分別比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(