版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、1型糖尿病是一種在遺傳基礎(chǔ)上由環(huán)境因素觸發(fā)的T細(xì)胞介導(dǎo)的慢性自身免疫性疾病,免疫系統(tǒng)選擇性攻擊胰島β細(xì)胞,導(dǎo)致β細(xì)胞的損傷以及胰島素的絕對(duì)缺乏。1型糖尿病發(fā)病機(jī)制還不完全清楚,一般認(rèn)為1型糖尿病的發(fā)病與Th1/Th2細(xì)胞失衡有關(guān)。 1型糖尿病占糖尿病患者總數(shù)的5%-10%,全國(guó)1型糖尿病患者總數(shù)至少100萬(wàn)人。目前1型糖尿病的治療仍以補(bǔ)充外源胰島素為主,這種治療常導(dǎo)致血糖控制不穩(wěn),容易產(chǎn)生酮癥酸中毒和低血糖,其心、腦、腎慢性并發(fā)
2、癥也給病人帶來(lái)極大痛苦,甚至威脅生命。胰島素替代治療并沒(méi)有干預(yù)引起疾病的自身免疫過(guò)程,不能阻斷免疫系統(tǒng)對(duì)胰島β細(xì)胞的損傷。因此,用免疫學(xué)方法預(yù)防和治療1型糖尿病,可抑制胰島β細(xì)胞的自身免疫、拯救殘留的β細(xì)胞,已成為當(dāng)今國(guó)內(nèi)外研究的焦點(diǎn)。 玉竹(Polygonatum Odoratum(Mill.)Druce)為百合科黃精屬中草藥,含有多糖、生物堿、菸酸、黃酮、甾體皂甙等。玉竹的干燥根莖具有降血糖、降血脂和抗腫瘤等作用。我們前期研
3、究發(fā)現(xiàn)玉竹提取物A具有抑制細(xì)胞免疫應(yīng)答,抑制IL-2、IL-1和TNF-α產(chǎn)生的作用,又證實(shí)玉竹提取物A對(duì)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠有明顯的降血糖作用,因此有必要進(jìn)一步揭示其可能的作用機(jī)制。 鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)是一鏈霉素菌來(lái)源的毒性物質(zhì),又包含了一個(gè)烷基化的亞硝基部分的糖分子組成,被廣泛用于糖尿病的化學(xué)誘導(dǎo)。STZ能通過(guò)其本身含有的葡萄糖部分結(jié)構(gòu)被胰島β細(xì)胞上低親和力的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GLUT2
4、轉(zhuǎn)運(yùn),特異性地作用于胰島β細(xì)胞,引起其結(jié)構(gòu)破壞。小劑量的STZ對(duì)胰島β細(xì)胞沒(méi)有明顯的細(xì)胞毒作用,但可導(dǎo)致胰島β細(xì)胞的抗原發(fā)生改變,激活巨噬細(xì)胞,誘導(dǎo)T細(xì)胞浸潤(rùn)和自身免疫應(yīng)答發(fā)生,引起對(duì)胰島β細(xì)胞的損傷,最終導(dǎo)致1型糖尿病的發(fā)生。 本實(shí)驗(yàn)以多次小劑量STZ(multiplelowdose,MLD-STZ)誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠模型為研究對(duì)象,觀察玉竹提取物A對(duì)1型糖尿病小鼠血糖、胰島炎程度、胰島β細(xì)胞結(jié)構(gòu)及脾上清液中細(xì)胞因子的影響情
5、況,探討玉竹提取物A對(duì)STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠的治療作用及其可能的作用機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)材料與方法: 選用清潔級(jí)6周齡雄性BALB/c小鼠34只,隨機(jī)抽取6只為正常對(duì)照組只注射等體積的枸櫞酸鈉緩沖液,其余小鼠均采用MLD-STZ誘導(dǎo)1型糖尿病模型。用末梢全血快速血糖測(cè)定法檢測(cè)血糖、尿糖試紙法檢測(cè)尿糖,動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)接受STZ誘導(dǎo)的小鼠是否達(dá)到1型糖尿病模型鼠的標(biāo)準(zhǔn)。STZ末次注射后4周共有21只小鼠達(dá)到成模標(biāo)準(zhǔn),從中隨機(jī)抽取一只處
6、死取胰腺做病理學(xué)觀察,將其余20只小鼠按血糖高低均衡分為4組(玉竹提取物A2,4,8g/kg劑量組和糖尿病模型組),每組5只。玉竹提取物A2,4,8g/kg劑量組分別按2,4,8g/kg劑量用玉竹提取物A灌胃,糖尿病模型組和正常對(duì)照組用蒸餾水灌胃0.2ml/只,各組灌胃均為1次/d,共4周。在用藥過(guò)程中,每周檢測(cè)1次血糖,共4次。四周后將各組小鼠處死取胰腺做HE染色,光鏡下觀察胰島的組織學(xué)改變;分別從顯著降糖劑量組、糖尿病模型組和正常對(duì)
7、照組隨機(jī)抽取1只小鼠,取新鮮胰腺組織經(jīng)固定、脫水、包埋、切片、染色,在透射電鏡下觀察胰島β細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu);各組小鼠采用酶聯(lián)免疫分析法檢測(cè)脾細(xì)胞上清液中IL-4和IFN-γ水平。數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示,數(shù)據(jù)經(jīng)t檢驗(yàn)處理,P<0.05為差異顯著。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果: STZ末次注射后4周共有21只小鼠達(dá)到成模標(biāo)準(zhǔn),血糖和尿糖明顯增高,造模成功率為75%。隨機(jī)處死的1只成模小鼠,胰島病理學(xué)結(jié)果顯示胰島β細(xì)胞數(shù)量減少,并有淋
8、巴、單核細(xì)胞浸潤(rùn),提示1型糖尿病模型制備成功。用藥治療后,與糖尿病模型組比較,玉竹提取物A4g/kg和8g/kg劑量組血糖顯著性降低,而2g/kg劑量組血糖有下降趨勢(shì),但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,玉竹提取物A4g/kg和8g/kg劑量組為顯著降糖劑量組。玉竹提取物A4g/kg和8g/kg劑量組小鼠胰島炎程度較糖尿病模型組明顯緩解,而2g/kg劑量組小鼠胰島炎程度與糖尿病模型組相近。玉竹提取物A顯著降糖劑量組小鼠胰島B細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)受損程度與糖尿病模
9、型組比較明顯減輕。糖尿病模型組小鼠脾細(xì)胞上清液中IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比值都明顯高于正常對(duì)照組;與糖尿病模型組比較,玉竹提取物A4g/kg和8g/kg劑量組小鼠脾細(xì)胞上清液中IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值均顯著性降低,而2g/kg劑量組兩者降低均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;各組小鼠脾細(xì)胞上清液中IL-4水平均無(wú)顯著性差異。 討論: 由于人體實(shí)驗(yàn)的局限,對(duì)1型糖尿病治療的研究多用動(dòng)物模型。采用MLD-STZ誘導(dǎo)
10、的1型糖尿病動(dòng)物模型,以其對(duì)胰島β細(xì)胞的最小毒性誘導(dǎo)自身反應(yīng)性T細(xì)胞參與對(duì)胰島細(xì)胞的破壞為主要特征,與人類(lèi)1型糖尿病的表現(xiàn)相似。目前國(guó)際上多采用此法建立1型糖尿病模型。 本實(shí)驗(yàn)采用MLD-STZ誘導(dǎo)1型糖尿病小鼠模型,用來(lái)觀察玉竹提取物A對(duì)其的治療作用。結(jié)果顯示,與糖尿病模型組比較,玉竹提取物A4g/kg和8g/kg劑量組血糖顯著性降低,而2g/kg劑量組血糖下降沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示玉竹提取物A對(duì)STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠有降糖
11、作用,且有劑量依賴性。 胰島病理學(xué)結(jié)果顯示,糖尿病模型組小鼠胰島β細(xì)胞數(shù)量減少,胰島內(nèi)可見(jiàn)大量炎細(xì)胞浸潤(rùn);與之相比,玉竹提取物A4g/kg和8g/kg劑量組小鼠胰島炎細(xì)胞浸潤(rùn)減少,完整的胰島β細(xì)胞增多。同時(shí),電鏡觀察結(jié)果顯示,糖尿病模型組小鼠胰島β細(xì)胞出現(xiàn)核固縮、核膜破裂、內(nèi)漿網(wǎng)擴(kuò)張、分泌顆粒減少并出現(xiàn)空泡樣變等異常變化;玉竹提取物A顯著降糖劑量組小鼠胰島β細(xì)胞的胞核、核膜、內(nèi)漿網(wǎng)等受損程度較糖尿病模型組明顯減輕,分泌顆粒增多。
12、提示玉竹提取物A治療可以緩解1型糖尿病小鼠的胰島炎、使胰島β細(xì)胞的破壞減輕。 初始Th(T-helper)細(xì)胞的TCR與抗原結(jié)合后,可在不同微環(huán)境影響下分化成Th1或Th2效應(yīng)細(xì)胞。Th1細(xì)胞分泌IL-2、IFN-γ和TNF-β;Th2細(xì)胞分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-10。IFN-γ/IL-4的比值常用以代表Th細(xì)胞的極化傾向。在正常情況下,Th1/Th2細(xì)胞處于相互抑制和相互調(diào)節(jié)的平衡狀態(tài)。如果這種平衡被打破,機(jī)體
13、處于Th1強(qiáng)勢(shì)或Th2強(qiáng)勢(shì)的極化(漂移)狀態(tài),則可能產(chǎn)生各種病理反應(yīng)。國(guó)內(nèi)外大量的實(shí)驗(yàn)研究表明,1型糖尿病的發(fā)病機(jī)制主要是由于Th1/Th2細(xì)胞亞群的平衡被破壞,即是由Th1/Th2細(xì)胞比值失衡所引起的。Th1細(xì)胞是主要效應(yīng)細(xì)胞,可直接或間接破壞胰島β細(xì)胞,而Th2細(xì)胞對(duì)Th1細(xì)胞的功能有抑制作用,可以減緩Th1細(xì)胞對(duì)胰島β細(xì)胞的破壞作用。有研究發(fā)現(xiàn),使用IFN-γ單克隆抗體或給予IL-4可預(yù)防NOD鼠發(fā)生糖尿病。另外用IFN-γ單克隆
14、抗體可預(yù)防MLD-STZ誘導(dǎo)的C57BL/KsJ鼠發(fā)生高血糖和胰島炎。 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,糖尿病模型組小鼠脾細(xì)胞分泌的IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比值都明顯高于正常對(duì)照組,表現(xiàn)出明顯的Th1極化傾向,這與國(guó)內(nèi)外許多研究結(jié)果相一致。與糖尿病模型組相比,玉竹提取物A4g/kg和8g/kg劑量組小鼠脾細(xì)胞分泌的IFN-γ水平顯著性降低,IL-4沒(méi)有明顯變化,IFN-γ/IL-4比值顯著性降低,即顯著抑制了糖尿病小鼠脾細(xì)胞的Th1
15、極化程度,而2g/kg劑量組的抑制作用沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說(shuō)明此抑制作用有劑量依賴性。因此,可以認(rèn)為玉竹提取物A主要是通過(guò)下調(diào)Th1細(xì)胞的極化程度,降低IFN-γ的分泌量,抑制Th1細(xì)胞的免疫功能,減輕或阻止自身免疫應(yīng)答,減少對(duì)胰島β細(xì)胞的破壞。這也與我們前期研究發(fā)現(xiàn)玉竹提取物A具有抑制IL-2、IL-1和TNF-α細(xì)胞因子產(chǎn)生的作用相關(guān)。 以上結(jié)果說(shuō)明玉竹提取物A能顯著抑制STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠細(xì)胞免疫功能,降低其自身免疫功能
16、對(duì)胰島β細(xì)胞的破壞,減輕胰島炎的程度,發(fā)揮降低血糖作用。 結(jié)論: 1、玉竹提取物A能顯著降低STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠的血糖,其降糖效果有劑量依賴性;玉竹提取物A治療還可以緩解1型糖尿病小鼠的胰島炎、使胰島β細(xì)胞的破壞減輕。 2、玉竹提取物A的作用機(jī)制可能是顯著抑制STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠Th1細(xì)胞的極化程度,降低IFN-γ的分泌量,下調(diào)細(xì)胞免疫功能,減少對(duì)胰島β細(xì)胞的破壞,減輕胰島炎的程度,發(fā)揮降低血糖作用。
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 苦瓜不同提取物對(duì)STZ誘導(dǎo)Ⅱ型糖尿病小鼠降血糖的作用研究.pdf
- sEH基因敲除治療STZ誘導(dǎo)的小鼠糖尿病腎病的作用及其機(jī)制.pdf
- 湖北麥冬對(duì)STZ誘導(dǎo)2型糖尿病小鼠的治療作用及其作用機(jī)理的研究.pdf
- 海南苦丁茶提取物對(duì)二型糖尿病小鼠降血糖作用及其機(jī)制的研究.pdf
- FoxO1在STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠模型中的作用機(jī)制.pdf
- 樺褐孔菌提取物治療STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 雷公藤對(duì)STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病小鼠的療效研究.pdf
- 知母提取物改善3型糖尿病作用機(jī)制初探.pdf
- 中藥提取物對(duì)糖尿病小鼠模型的治療機(jī)理研究.pdf
- GLP-1對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠胰島β細(xì)胞自噬的影響及其機(jī)制.pdf
- 蘆根乙醇提取物對(duì)糖尿病小鼠降血糖作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 玉米須提取物對(duì)2型糖尿病大鼠糖脂代謝影響及其機(jī)制探討.pdf
- 馬鈴薯提取物皂苷抗糖尿病作用及其機(jī)制研究.pdf
- 復(fù)方樹(shù)莓提取液對(duì)STZ誘導(dǎo)的2型糖尿病小鼠影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 桑皮粉添食對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的防治作用.pdf
- 細(xì)菌型豆豉提取物對(duì)糖尿病的防治作用及機(jī)理研究.pdf
- 桑白皮提取物對(duì)2型糖尿病大鼠肝臟的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf
- 桑葉中α-葡萄糖苷酶抑制物質(zhì)的提取方法及其提取物對(duì)糖尿病小鼠治療作用的研究.pdf
- 南瓜多糖對(duì)1型糖尿病大鼠的降糖作用及其機(jī)制探討.pdf
- 臍血干細(xì)胞對(duì)1型糖尿病小鼠的治療作用及機(jī)制.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論