Lewis y抗原及α1,2-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶基因在三組卵巢癌細(xì)胞系中的表達(dá).pdf

1、前言:卵巢癌在婦科惡性腫瘤中病死率居首位，卵巢癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制一直是婦科腫瘤基礎(chǔ)與臨床研究探索的重點(diǎn)，了解卵巢癌生物學(xué)行為的控制方法及發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制對(duì)于卵巢癌的預(yù)防及治療十分重要。
　　 卵巢癌的發(fā)生與發(fā)展是一個(gè)極其復(fù)雜的多因素的過(guò)程，目前對(duì)其發(fā)生機(jī)理尚不清楚。近年來(lái)，糖復(fù)合物和腫瘤的關(guān)系受到廣泛關(guān)注。糖復(fù)合物是細(xì)胞膜的重要組成部分，對(duì)細(xì)胞-細(xì)胞、細(xì)胞-分子的識(shí)別十分重要，參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、分子粘附等分子相互作用，與細(xì)胞生長(zhǎng)、凋

2、亡、運(yùn)動(dòng)、分化等生命過(guò)程密切相關(guān)。細(xì)胞癌變后細(xì)胞膜上的糖復(fù)合物，特別是其糖鏈部分發(fā)生結(jié)構(gòu)和量的變化。卵巢癌主要表現(xiàn)為Ⅱ型糖鏈的改變，如Lewisy抗原。研究表明75％的上皮性卵巢癌出現(xiàn)Lewisy不同程度的過(guò)量表達(dá)，且表達(dá)增高的患者預(yù)后不良。在前期工作中利用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)將人α1，2-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶（α1，2-FT）基因轉(zhuǎn)入卵巢癌細(xì)胞系RMG-Ⅰ，建立了Lewisy穩(wěn)定高表達(dá)卵巢癌細(xì)胞系RMG-Ⅰ-H，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染后RMG-Ⅰ-H細(xì)胞對(duì)化療藥5

3、-FU、卡鉑等的敏感性下降，提示Lewisy抗原具有提高卵巢癌細(xì)胞生存能力的作用。
　　 本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同生物學(xué)性狀的卵巢癌細(xì)胞系中Lewisy抗原及α1，2-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶(α1，2-FT)基因FUT1表達(dá)變化，探討其對(duì)卵巢癌細(xì)胞增殖、耐藥和轉(zhuǎn)移的影響。
　　 方法:采用免疫細(xì)胞化學(xué)法、免疫細(xì)胞熒光法測(cè)定α1，2-FT基因轉(zhuǎn)染前后的人卵巢癌細(xì)胞系RMG-Ⅰ和RMG-Ⅰ-H、人卵巢癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系HO8910PM及親本細(xì)胞系H

4、O8910、人卵巢癌耐藥細(xì)胞系COC1/DDP及親本細(xì)胞系COC1中Lewisy抗原的表達(dá)。利用RT-PCR法及reαl-time PCR法檢測(cè)上述三組細(xì)胞中α1，2-FT基因(FUT1)表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果:經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)方法分析，α1，2-FT基因的產(chǎn)物，Lewisy抗原，在RMG-Ⅰ-H、HO8910PM及COC1/DDP細(xì)胞系中的表達(dá)強(qiáng)度分別為53.90士4.33，37.31±0.19和28.52±1.45，與相應(yīng)的

5、親本細(xì)胞系RMG-Ⅰ（32.18士0.64）、HO8910（14.96±0.61）及COC1（19.26±0.83）比較均明顯升高，且廣泛分布于細(xì)胞膜上。與RMG-Ⅰ相比，RMG-Ⅰ-H中的α1，2-FT基因表達(dá)上調(diào)3.07倍；與HO8910相比，HO8910PM中的α1，2-FT基因表達(dá)上調(diào)2.13倍；與COC1相比，COC1/DDP中的α1，2-FT基因表達(dá)上調(diào)2.42倍。
　　 結(jié)論:Lewisy及α1，2-巖藻糖轉(zhuǎn)移酶基