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文檔簡介
1、目的:1)研究D-氨基半乳糖聯(lián)合脂多糖誘導(dǎo)急性肝衰竭小鼠肝組織和血清 miRNAs表達(dá)的相關(guān)性;2)研究乙肝病毒感染相關(guān)肝衰竭患者血清 miR-122的表達(dá)及其與疾病預(yù)后的關(guān)系。
方法:應(yīng)用D-氨基半乳糖聯(lián)合脂多糖構(gòu)建BALB/c小鼠急性肝衰竭模型,留取給藥后0、3、5、7小時(shí)血清及肝組織,0、5、7h肝組織進(jìn)行鎖核酸(LNA)-miRNA微陣列分析。觀察小鼠肝組織學(xué)病理變化,檢測血清ALT、AST水平,抽提血清及肝組織miR
2、NAs,并用實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)檢測miRNAs。收集瑞金醫(yī)院感染科58例乙肝病毒感染相關(guān)肝衰竭、10例急性乙型肝炎、22例慢性乙型肝炎、10例慢性丙型肝炎和10例急性戊型肝炎患者血清及瑞金醫(yī)院體檢中心23例健康者的血清。抽提血清miRNAs,實(shí)時(shí)定量PCR法檢測miR-122相對(duì)表達(dá)量。組間均數(shù)比較用單因素方差分析,相關(guān)性分析采用Pearson和Spearman相關(guān)分析。
結(jié)果:鎖核酸(LNA)-miRNA微陣列分析顯
3、示,急性肝衰竭模型組小鼠肝組織miR-146a、miR-155表達(dá)上調(diào),miR-122、miR-1187表達(dá)明顯下調(diào)。采用PCR進(jìn)一步驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)隨著給藥后肝功能衰竭的逐漸發(fā)生,肝組織miR-146a和miR-155表達(dá)逐漸上升,血清miR-146a和miR-155的表達(dá)也明顯上調(diào);小鼠肝組織miR-122和miR-1187表達(dá)下調(diào),而血清miR-122和miR-1187的表達(dá)則逐漸上調(diào),血清與組織miR-122及miR-1187的相對(duì)表達(dá)
4、量呈負(fù)相關(guān)。小鼠血清miR-122、miR-1187和miR-155相對(duì)表達(dá)量與ALT呈正相關(guān),血清miR-146a在建模3h上調(diào),血清miR-122和 miR-1187在給藥5h上升,早于血清轉(zhuǎn)氨酶的變化。實(shí)時(shí)定量PCR發(fā)現(xiàn)乙型肝炎肝衰竭、慢性乙型肝炎、急性乙型肝炎、慢性丙型肝炎和急性戊型肝炎患者血清 miR-122相對(duì)表達(dá)量均有不同程度的上升,其中乙型肝炎肝衰竭和慢性乙型肝炎患者升高水平更明顯。乙型肝炎肝衰竭患者按照MELD評(píng)分分為
5、四組(MELD評(píng)分≤20;20
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