癌癥相關(guān)成纖維細胞和胸腺嘧啶合成酶表達與結(jié)直腸癌耐藥的研究.pdf

1、背景:結(jié)直腸癌是危害人類健康的常見惡性腫瘤之一。在西方發(fā)達國家，結(jié)直腸癌已占惡性腫瘤死亡人數(shù)的第2位。我國有關(guān)資料顯示，大腸癌發(fā)病率占全部惡性腫瘤的第4位，并有逐漸增加的趨勢。但目前對結(jié)直腸癌有效的評估、治療和預后等方面的研究仍沒有實質(zhì)性進展。
　　越來越多的研究證實，腫瘤的發(fā)生和發(fā)展，與腫瘤細胞所處的微環(huán)境密切相關(guān)。腫瘤微環(huán)境主要由間質(zhì)細胞以及細胞外基質(zhì)(extracellularmatrixc，ECM)構(gòu)成。間質(zhì)細胞包括成纖維

2、細胞、血管內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞以及各種炎細胞等。腫瘤微環(huán)境中的間質(zhì)成分不同于正常組織學中的間質(zhì)成分。腫瘤微環(huán)境中的間質(zhì)成分為反應(yīng)性間質(zhì)成分，通過與腫瘤細胞的相互作用在腫瘤的形成與演進過程中扮演了重要角色。
　　腫瘤微環(huán)境中的成纖維細胞被稱為癌癥相關(guān)成纖維細胞，是腫瘤微環(huán)境中間質(zhì)細胞的主要類型，是活化的成纖維細胞，兼有成纖維細胞和平滑肌細胞的特點和功能。免疫組織化學染色顯示其表達平滑肌肌動蛋白SMA、中間絲蛋白vimeniin和結(jié)蛋

3、白desmin。SMA是公認的癌癥相關(guān)成纖維細胞的通用標記物。研究表明部分腫瘤周邊的癌癥相關(guān)成纖維細胞可能通過旁分泌作用（間質(zhì)一上皮相互作用），引起腫瘤細胞的轉(zhuǎn)化、基質(zhì)成分的改變、血管生成等而促進或抑制腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。
　　目前結(jié)直腸癌的治療仍以手術(shù)和化療為主。5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)作為結(jié)直腸癌的一線化療藥，其化療療效常受到耐藥性的限制。胸腺嘧啶合成酶(thymidylate synthase，T

4、S)是5-FU發(fā)揮細胞毒作用的主要靶酶。TS功能的變異可影響5-FU的毒性與療效，TS表達水平與腫瘤細胞對5-FU的敏感性密切相關(guān)。
　　目前對于結(jié)直腸癌間質(zhì)癌癥相關(guān)成纖維細胞的觀察剛剛起步，有關(guān)結(jié)直腸癌間質(zhì)內(nèi)SMA陽性癌癥相關(guān)成纖維細胞及TS表達與腫瘤化療效果關(guān)系的研究尚未見報道。
　　目的:探討SMA陽性癌癥相關(guān)成纖維細胞及TS表達與結(jié)直腸癌術(shù)后化療效果的關(guān)系。
　　方法:采用免疫組織化學ElivisionTM p

5、lus兩步法的方法，研究10例正常結(jié)腸粘膜、30例結(jié)直腸癌中SMA和TS的表達情況，分析其與臨床病理特征的關(guān)系及四者之間相互作用關(guān)系。統(tǒng)計分析采用SPSS13.0軟件，數(shù)據(jù)采用x2檢驗、Fisher確切概率法及相關(guān)分析。
　　結(jié)果:
　　1.SMA免疫組化染色
　　SMA陽性物質(zhì)在對照組主要分布于粘膜層的中下部，呈線狀圍繞在固有層腺體周圍，底部與粘膜肌層形成連接。
　　結(jié)直腸癌標本中，除間質(zhì)血管壁平滑肌組織外，S

6、MA廣泛表達于腫瘤間質(zhì)內(nèi)，其染色強度不等，多數(shù)強染色。
　　13例男性患者中CAF低比例組有8例，高比例組有5例;17例女性患者中，CAF低比例組有10例，高比例組有7例;統(tǒng)計分析顯示無顯著差異(P=1.000)。(Table1)11例年齡＜60歲患者中，CAF低比例組有6例，高比例組有5例;19例≥60歲患者中，CAF低比例組有12例，高比例組有7例;結(jié)果顯示無顯著差異(P=0.712)。(Table1)30例結(jié)直腸癌患者，Ⅰ期

7、CAF低比例組有2例，高比例組有1例;Ⅱ期CAF低比例組有10例，高比例組有5例;Ⅲ期CAF低比例組有6例，高比例組有5例;Ⅳ期無CAP低比例病例，高比例有1例;統(tǒng)計分析顯示不同臨床分期的CAF比例無顯著差異（P=0.579）。(Table1)17例高中分化患者中CAF低比例組有10例，高比例組有7例;13例低分化組CAF低比例組有8例，高比例組有5例;統(tǒng)計分析顯示不同組織學分級的CAF比例無顯著差異（P=0.856）。(Table1)

8、19例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中CAF低比例組有12例，高比例組有7例;11例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組CAF低比例組有6例，高比例組有5例;統(tǒng)計分析顯示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與CAF比例無顯著差異（P=0.712）。(Table1)12月內(nèi)死亡的病例CAF低比例組有5例，高比例組有2例;生存期在12～24月的病例CAF低比例組有1例，高比例組有3例;生存期在25～36月的病例CAF低比例組有2例，高比例組有3例;生存期在37～48月的病例CAF低比例組有1例，高比例組

9、有2例;生存時間大于48個月的病例CAF低比例組有9例，高比例組有2例;統(tǒng)計分析顯示不同生存期與CAF比例無顯著差異(P=0.386)。(Table2)進一步統(tǒng)計30例結(jié)直腸癌患者生存時間與化療及CAF間關(guān)系表明，結(jié)果表明均無顯著性差異（P=0.498，P=0.277）。(Table3)
　　2.TS染色:
　　TS在正常對照組腸粘膜無陽性表達。在30例結(jié)直腸癌組織中有14例表達陽性，16例陰性表達。
　　13例男性患

10、者中TS陽性表達6例，陰性7例;17例女性患者中，TS陽性表達8例，陰性9例;統(tǒng)計分析TS表達在性別間無顯著差異(P=1.000)。(Table1)11例年齡＜60歲患者中，TS陽性表達7例，陰性4例;19例＞60歲患者中，TS陽性7例，陰性12例;統(tǒng)計分析顯示不同年齡患者間TS表達無顯著差異（P=0.257）。(Table1)30例結(jié)直腸癌患者，Ⅰ期TS陽性1例，陰性2例;Ⅱ期TS陽性8例，陰性7例;Ⅲ期TS陽性5例，陰性6例;Ⅳ期無

11、TS陽性病例，陰性表達1例;統(tǒng)計分析顯示不同臨床分期的TS表達無顯著差異（P=0.714）
　　17例高中分化患者TS陽性7例，陰性10例;13例低分化組TS陽性7例，陰性6例;統(tǒng)計分析顯示不同組織學分級的TS表達無顯著差異（P=0.713）(Table1)19例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者TS陽性9例，陰性10例;11例低分化組TS陽性5例，陰性6例;統(tǒng)計分析顯示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與TS表達無顯著差異(P=1.000)(Table1)12月內(nèi)死亡的

12、病例中TS陽性3例，陰性4例;生存期在12～24月的病例TS陽性1例，陰性3例;生存期在25～36月的病例中TS陽性2例，陰性3例;生存期在37～48月的病例TS陽性1例，陰性2例;生存時間大于48個月的病例TS陽性7例，陰性4例;統(tǒng)計分析顯示不同生存期與TS表達無顯著差異（P=0.289）。(Table2)進一步統(tǒng)計30例結(jié)直腸癌患者生存時間與化療及TS表達關(guān)系表明，結(jié)果顯示無顯著性差異（P=0.857，P=0.550）。(Table

13、4)
　　3.CAF比例和TS表達相關(guān)性分析統(tǒng)計分析進一步顯示，結(jié)直腸癌組織中CAF比例和TS的表達之間沒有相關(guān)性(r=0.055，P＞0.05)(Table5)。
　　結(jié)論:
　　1.結(jié)直腸癌患者的性別、年齡、臨床分期、組織學類型、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、化療后生存時間等均與間質(zhì)內(nèi)癌癥相關(guān)成纖維細胞比例無關(guān)。
　　2.結(jié)直腸癌患者的性別、年齡、臨床分期、組織學類型、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移化療后生存時間等與癌組織TS陽性表達無關(guān)