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1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文封閉人群高齲兒童唾液微生物的構(gòu)成分析姓名:羅愛(ài)華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:楊德琴20100501遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文封閉人群高齲無(wú)齲兒童唾液微生物的構(gòu)成分析方法:樣本分別取自30個(gè)高齲兒童和20個(gè)無(wú)齲兒童的唾液,提取唾液總DNA,行16SrRNA特異性序列片段PCR擴(kuò)增,產(chǎn)物經(jīng)熒光素Cy3dCTP標(biāo)記后與基于16SrRNA寡核苷酸探針?biāo)苽涞腍OMIM雜交,專用軟件處理數(shù)據(jù):應(yīng)用SYBRGre
2、enI模式的熒光定量PCR檢測(cè)唾液中變異鏈球菌,口腔鏈球菌,遠(yuǎn)緣鏈球菌,乳酸桿菌,內(nèi)氏放線菌使用聚類分析、秩和檢驗(yàn)及卡方檢驗(yàn)等結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:DNA微陣列分析發(fā)現(xiàn)(1)高齲組和無(wú)齲組共50名受試者唾液樣本中共檢測(cè)到94個(gè)熒光帶分別歸屬于6個(gè)門(mén)類,30個(gè)屬。高齲組個(gè)體唾液微生物種型或類群數(shù)量(中位數(shù)33)高于無(wú)齲組(中位數(shù)25),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P005);(2)一些菌屬和細(xì)菌在高齲組中的檢出率或數(shù)量高于無(wú)齲組僻005),如擬
3、桿菌(Bacteroidetes[G2JspcloneAUl26一ot274)、二氧化碳嗜纖維菌屬(Ca矽nocytophagagranulosaandspcloneBB167一ot325一、Capnocytophagasputigena__ot775)、梭桿菌屬(Fusobactenumperiodontium__ot201、Fusobacteriumnucleammssnucleatumandanimalis—ot420—698)、
4、普雷沃菌屬(PrevotellaloescheiiandspcloneGU027ot472)、坦納菌屬(TannerellaspcloneBU063ot286)、心肝菌屬(Cardiobacteriumhominisot633)、彎曲茵屬(Campylobactershowae_ot763、CampylobacterClusterl_ot580_748—763)、新月形單胞茵屬(Selenomonas&felixandspclonesE
5、Y047andGTOIOand11(004otl26479481639054)、纖毛菌屬(Leptotrichiaho必tadh、一o)t2;24(L3ep)to—tr些ich菌iabuccalisandgoodfellowiiandSneathiasanguinegens_ot563_837845屬和細(xì)菌在無(wú)齲組中的檢出率或數(shù)量高于高齲組(PO05),如嗜血桿菌屬(Haemophilusparainfluenzae_ot718一W79
6、)攣生茵屬(Gemellahaemolysansot626K63、Granulicatellaelegans)鏈球菌屬_ot596AB29(Streptococcusintermedius—ot644、Streptococcusmittsby2andspcloneFP064一ot069—398、StreptococcusoralisandspclonesC5MLM037andEK048一ot064—707、Streptococcussp
7、cloneF0042一ot067、Streptococcusinfan/t)andspcloneFN042ot065638)、羅氏菌屬(Rothiadentocariosaot587)。(4)遠(yuǎn)緣鏈球菌、乳桿菌、內(nèi)氏放線菌在高齲和無(wú)齲組中均無(wú)檢出,變異鏈球菌和唾液鏈球菌在高齲組中僅檢出1例。(5)和牙菌斑分析結(jié)果比較:①相同無(wú)齲個(gè)體菌斑微生物的多樣性(中位數(shù)39)高于唾液(中位數(shù)25)(凡統(tǒng)勸;相同高齲個(gè)體唾液微生物的多樣性(中位數(shù)33
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