肺腺癌中EGFR突變豐度與EGFR-TKI治療療效相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討不同EGFR突變含量的肺腺癌與EGFR-TKI療效的相關(guān)性，為臨床用藥提供理論依據(jù)。
　　方法：選擇兩種肺腺癌細(xì)胞系，一種為PC-9，EGFR19號(hào)外顯子缺失突變，KRAS野生型，對(duì)吉非替尼高度敏感，另一種為SPC-A1，EGFR和KRAS均為野生型，對(duì)吉非替尼耐藥。并將培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期的PC-9及SPC-A1細(xì)胞按4種不同比例：A組PC-9含量100％，B組PC-9及SPC-A1含量均為50％，C組：PC-9含量30％，S

2、PC-A1含量為70％，D組SPC-A1含量,為100％，混合制成細(xì)胞懸液，接種至裸鼠左側(cè)腋下，使其成瘤，每個(gè)比例接種20只，當(dāng)腫瘤長(zhǎng)至190-220mm3時(shí)，將每組裸鼠再隨機(jī)均分為3組：實(shí)驗(yàn)組8只，對(duì)照組8只及給藥前檢測(cè)組4只.給藥前檢測(cè)組處死，提取腫瘤DNA進(jìn)行EGFR突變量檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)組給予吉非替尼灌胃，10mg/kg/d，連續(xù)給藥21天。對(duì)照組給予等量1％吐溫80灌胃，連續(xù)給藥21天。隔天記錄裸鼠體重及瘤體體積。21天后將所有裸鼠

3、處死，提取DNA進(jìn)行行EGFR突變量檢測(cè)。
　　結(jié)果：
　　1.PC-9細(xì)胞EGFR基因具有19del突變，KRAS基因無突變，SPC-A1細(xì)胞EGFR及KRAS基因均無突變；
　　2.吉非替尼對(duì)100％突變（A組）裸鼠腫瘤具有很強(qiáng)的抑制作用（P<0.01），持續(xù)給藥21天后，實(shí)驗(yàn)組平均瘤重為（85±21.13）mg，對(duì)照組平均瘤重為（1066.25±203.35） mg，第21天抑瘤率達(dá)到92.03％。吉非替尼對(duì)50

4、％突變（B組）裸鼠腫瘤具有較強(qiáng)的抑制作用（P<0.05），給藥21天后，實(shí)驗(yàn)組平均瘤重為（1923.01±187.18）mg，對(duì)照組平均瘤重為（2676.55±207.50）mg，第21天抑瘤率達(dá)到28.15％。吉非替尼對(duì)于30％突變（C組）裸鼠腫瘤出現(xiàn)短暫的抑制作用，用藥第7天到第9天，實(shí)驗(yàn)組腫瘤與對(duì)照組腫瘤體積出現(xiàn)顯著性差異（P<0.05），用藥21天，實(shí)驗(yàn)組平均瘤重為（2579.47±219.28）mg，對(duì)照組平均瘤重為（2359

5、.29±388.49）mg，第21天抑瘤率達(dá)到1.07％。吉非替尼對(duì)于無突變組（D組）裸鼠腫瘤無抑制作用（P>0.05）。
　　3.腫瘤EGFR突變檢測(cè)給藥前A組的突變含量大于70％，B組為20％-50％之間，C組在5％-10％之間，而D組突變小于1％。給藥21天后，對(duì)照組與給藥前組相比，△CT沒有顯著性差異（P>0.05），腫瘤生長(zhǎng)穩(wěn)定；而實(shí)驗(yàn)組用藥后突變含量均小于1％，與對(duì)照組具有顯著性差異。抑瘤率與給藥前組△CT值及對(duì)照組△