不同臨床類型小鼠肝炎模型T細胞亞群的初步研究.pdf

1、目的鑒于病毒性肝炎主要為免疫介導的肝細胞炎性損傷過程，本課題旨在探索T細胞亞群在不同臨床類型小鼠病毒性肝炎發(fā)生發(fā)展過程中的作用，為病毒性肝炎的免疫治療提供新的思路。 方法取Balb/cJ和A/J小鼠各8只，腹腔注射100pfu3型鼠肝炎病毒(MHV-3)，采用流式細胞儀檢測感染后0、24、48、72h外周血、脾細胞懸液以及肝臟組織中T淋巴細胞亞群包括CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+及CD3+CD4-CD8-T(

2、DNT)細胞的細胞數(shù)及各自在T淋巴細胞中所占比率。利用免疫磁珠分選出DNT細胞(效應細胞)和CD8+T細胞(靶細胞)，然后采用MTT法(非特異性殺傷試劑盒)進行殺傷實驗。 結(jié)果Balb/cJ小鼠于感染后24h外周血、脾臟以及肝臟T淋巴細胞中DNT細胞比率明顯升高(外周血中由2.11％升至10.35％、脾臟中由9.37％升至34.38％、肝臟中由4.05％升至56.28％)直至小鼠3d后全部死亡，CD3+CD4+CD8-和CD3+

3、CD4-CD8+T淋巴細胞比率相應下降；A/J小鼠感染后24至96h外周血和脾臟T細胞各亞群變化不明顯。殺傷實驗提示隨著效靶比的升高，DNT細胞的殺傷活性呈現(xiàn)遞增趨勢。 結(jié)論兩種不同品系小鼠感染MHV-3后的不同轉(zhuǎn)歸、DNT細胞比率的不同改變及DNT細胞對于CD8+T細胞的抑制作用提示DNT細胞可能在病毒性肝炎發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用。 研究意義 HBV感染個體后可導致不同的臨床轉(zhuǎn)歸和病理類型，包括急性乙型肝炎(

4、輕，中，重度)和暴發(fā)性肝功能衰竭；肝臟病理學改變可表現(xiàn)為從輕微的炎性細胞侵潤，不伴有明顯的肝細胞損害(輕度)至大面積肝組織壞死，大量炎性細胞侵潤，廣泛微血管血栓形成(重度或暴發(fā)型)。且HBV感染后病情易發(fā)生慢性遷延或免疫耐受-慢性肝炎(輕，中，重度)提示不同個體對HBV感染的免疫應答有著顯著差異，機體某類內(nèi)源性細胞的保護效應可能起重要作用，但機制至今不明。利用不同品系小鼠感染MHV-3后所致不同臨床類型病毒性肝炎作為研究對象，深入開展此