不同樹(shù)突狀細(xì)胞亞群聯(lián)合誘導(dǎo)的CTL抗腫瘤效應(yīng)的初步研究.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文不同樹(shù)突狀細(xì)胞亞群聯(lián)合誘導(dǎo)的CTL抗腫瘤效應(yīng)的初步研究姓名：劉光輝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：小兒外科指導(dǎo)教師：王家祥20060530鄭州大學(xué)2∞6屆碩士學(xué)位論文不同樹(shù)突狀細(xì)胞亞群聯(lián)合誘導(dǎo)的cTL抗腫瘤效應(yīng)的初步研究腫瘤細(xì)胞全抗原是包含正常抗原成分和眾多腫瘤相關(guān)抗原及腫瘤特異性抗原的成分復(fù)雜的混合物。在理論上，負(fù)載腫瘤全抗原的DC可誘導(dǎo)出針對(duì)各抗原成分的cTL克隆，而應(yīng)用經(jīng)自身抗原致敏的iIIlDc則可清除其中針對(duì)自身抗

2、原的cTL克隆。因而，聯(lián)合應(yīng)用免疫激活型Dc和致耐受型Dc有望解決使用全抗原時(shí)的自身免疫反應(yīng)問(wèn)題。實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐囵B(yǎng)外周血來(lái)源單核細(xì)胞并誘導(dǎo)成為mDc和i【IlDc，分別負(fù)載人肝癌細(xì)胞株s刪c一7721和人胎肝細(xì)胞株L一02細(xì)胞凍融抗原(frozen—thawedantigen，F(xiàn)TA)。研究負(fù)載s～眥c一772l抗原的mDc和imDc分別誘導(dǎo)的cTL對(duì)人肝癌細(xì)胞株s咖c一7721、人食管癌細(xì)胞株Ec一109和人胃癌細(xì)胞株BGc一823細(xì)胞的

3、體外殺傷效應(yīng)，以及負(fù)載s刪C一7721抗原的mDC和負(fù)載L一02抗原的imDc聯(lián)合誘導(dǎo)的cTL對(duì)s姍C(jī)一7721和L—02細(xì)胞的體外殺傷效應(yīng)，并探討聯(lián)合曲c和imDc制備Dc腫瘤疫苗以消除或減弱常規(guī)方法制備的Dc腫瘤疫苗所致自身免疫反應(yīng)的可能性。實(shí)驗(yàn)方法1采用反復(fù)凍融法制備s棚爭(zhēng)7721及L_02細(xì)胞凍融抗原2Dc的分離、培養(yǎng)、抗原負(fù)載及T細(xì)胞的獲取Fic01l法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞，貼壁法對(duì)其進(jìn)行純化，并收集淋巴細(xì)胞培養(yǎng)備用。單核細(xì)胞

4、在24孔板上用含lO％自體血清、GM_cSF10ng／m1、IL一410ng／m1培養(yǎng)基，37℃、5％c02孵箱培養(yǎng)并按以下分組：A：曲c，第7天加入s刪c一772l細(xì)胞抗原；B：iJllDc，第5天加入IL—lO10ng／ml，第7天加入s佃蟠C一772l細(xì)胞抗原：C：imDc組，第5天培養(yǎng)基中加入IL一1010ng／m1，第7天加入L—02細(xì)胞抗原(各組所加抗原均為O5mg／孔)。各組另設(shè)無(wú)抗原對(duì)照，并隔天半量換液，第9天收獲備用。