肝臟在口服免疫致IgAN大鼠模型中的損傷與作用.pdf

1、目的:
　　通過觀察口服免疫致IgA腎病大鼠模型中肝臟的病理變化，探討致IgA腎病的造模劑對肝臟的損害;通過比較肝臟損害與腸道病變的關(guān)系，探討肝臟在口服免疫致IgA腎病中的作用，以期為IgA腎病發(fā)病機制的闡明及IgA腎病治療提供一個新的思路。
　　方法:
　　將28只雌性SD大鼠隨機分成4組:正常對照組、IgA腎病模型組(IgAN模型組)、大黃酸治療組和大黃酸預(yù)防組(n=7)。聯(lián)合應(yīng)用牛血清白蛋白(BSA)+脂多糖(L

2、PS)+四氯化碳(CCl4)建立IgA腎病大鼠模型。10周末處死動物，取小腸和肝臟標(biāo)本，采用HE染色法觀察各組大鼠小腸和肝臟的病理變化，電鏡觀察肝臟超微結(jié)構(gòu)變化，免疫熒光法檢測各組大鼠肝臟和腎臟IgA的沉積，免疫組織化學(xué)法標(biāo)記肝臟TLR4、TNF-α和CD68，用圖像分析系統(tǒng)測算TLR4和TNF-α的積分光密度，用體視學(xué)方法計算CD68+細(xì)胞的數(shù)密度、體密度和平均體積，統(tǒng)計學(xué)分析各組數(shù)據(jù)差異的意義。
　　結(jié)果:
　　1.組織

3、病理學(xué)檢查顯示，正常對照組大鼠肝臟結(jié)構(gòu)完整，肝內(nèi)細(xì)胞形態(tài)正常，未見炎性細(xì)胞浸潤;少數(shù)IgAN模型組大鼠肝臟切片中可見少量炎性細(xì)胞浸潤甚至肝細(xì)胞壞死，可見輕度肝細(xì)胞脂肪變性，匯管區(qū)可見少量纖維增生;大黃酸治療組和大黃酸預(yù)防組大鼠肝臟切片中可見肝細(xì)胞增生表現(xiàn)（雙核、肝細(xì)胞體積大），匯管區(qū)可見少量纖維增生。正常對照組大鼠小腸腸絨毛形態(tài)正常、無缺損，上皮細(xì)胞排列整齊，未見明顯炎性細(xì)胞浸潤;IgAN模型組大鼠小腸腸絨毛變矮變細(xì)、間距增寬，部分上皮

4、脫落，固有層中可見炎性細(xì)胞浸潤;大黃酸治療組和大黃酸預(yù)防組與IgAN模型組相比病變程度明顯減輕。各組肝臟與腸道病變程度的變化趨勢一致。
　　2.電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察顯示，正常對照組大鼠肝細(xì)胞胞核形態(tài)正常，基質(zhì)豐富，線粒體形態(tài)正常、結(jié)構(gòu)完整;IgAN模型組大鼠肝細(xì)胞中有較多脂滴，線粒體腫脹甚至空泡化;大黃酸治療組和大黃酸預(yù)防組與IgAN模型組相比，肝臟上述超微結(jié)構(gòu)病變減輕。
　　3.IgA免疫熒光檢查顯示，正常對照組大鼠肝臟沒有或

5、僅有微弱的IgA熒光;IgAN模型組大鼠肝臟有大量顆粒狀亮綠色I(xiàn)gA熒光，位于肝血竇中;與IgAN模型組相比，大黃酸治療組和大黃酸預(yù)防組大鼠肝臟IgA熒光顆粒明顯減少。正常對照組腎臟未見IgA免疫熒光;IgA腎病模型組腎小球系膜區(qū)可見亮綠色顆粒狀I(lǐng)gA免疫熒光沉積;大黃酸治療組和大黃酸預(yù)防組腎小球系膜區(qū)IgA免疫熒光沉積減少。
　　4.與正常對照組相比，IgAN模型組大鼠肝臟TLR4蛋白和TNF-α表達(dá)均明顯增加(P＜0.01);

6、與IgAN模型組相比，大黃酸治療組和大黃酸預(yù)防組大鼠肝臟TLR4蛋白和TNF-α表達(dá)均明顯減少(P＜0.01);大黃酸預(yù)防組比大黃酸治療組大鼠肝臟TNF-α表達(dá)更少(P＜0.05)。
　　5.與正常對照組相比，IgAN模型組大鼠肝臟CD68+細(xì)胞的數(shù)密度、體密度和平均體積明顯增大（P＜0.05或P＜0.01）。與IgAN模型組相比，大黃酸治療組與大黃酸預(yù)防組大鼠肝臟CD68+細(xì)胞的數(shù)密度明顯減小(P＜0.01)，平均體積增加(P＜