尿毒清顆粒對造影劑腎病的實驗研究.pdf

1、目的:
　　通過觀察尿毒清顆粒對造影劑腎病(CIN)大鼠腎功能、腎臟病理變化及組織KIM-1、NF-κB與TNF-α蛋白與mRNA表達的影響,探討其對CIN防治作用及可能的作用機制。
　　方法:
　　采用尾靜脈注射碘造影劑法制備CIN大鼠模型。144只成年雄性SD大鼠,體重250±50g,隨機分成3組:對照組(n=48)、CIN組(n=48)和尿毒清組(n=48)。其中,CIN組及尿毒清組均從尾靜脈注射76％復(fù)方泛影葡

2、胺注射液(10ml/kg)制備CIN大鼠模型,對照組用生理鹽水替代;尿毒清組在造模前1周給予尿毒清顆粒(2.5g/kg/d)每日灌胃至處死大鼠前,CIN組用等量生理鹽水替代。三組大鼠分別在造模后6h、12h、24h、48h、72h、5d、10d及15d時間點分別處死大鼠各6只,并留取血液及雙側(cè)腎臟標本。應(yīng)用生化(血Scr、BUN)和組織學(xué)(HE染色)指標評估腎功能及腎小管損傷的情況;免疫組化檢測腎臟KIM-1、NF-κB、TNF-α的蛋

3、白水平;RT-PCR檢測腎組織KIM-1mRNA、NF-κB mRNA、TNF-αmRNA的表達水平。
　　結(jié)果:
　　1.血清Scr、BUN檢測:對照組大鼠各時間點血清Scr、BUN水平變化均不大(P>0.05);CIN組與尿毒清組血清Scr、BUN在造模后呈逐漸升高趨勢,峰值均出現(xiàn)在48h,之后逐漸降低,15d恢復(fù)正常;尿毒清組血清Scr、BUN與CIN組有相同的變化趨勢,除10d及15d外,尿毒清組血清Scr、BUN水

4、平均明顯低于CIN組(P<0.05)。
　　2.腎小管間質(zhì)病理評分:對照組大鼠在造模前、后腎組織病理未見明顯改變,病理評分無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05);CIN組造模6h后即可見腎小管上皮細胞水腫,管腔阻塞,24h后可見少量腎小管上皮細胞刷狀緣脫落,部分腎小管結(jié)構(gòu)受損、上皮細胞變性壞死,部分腎間質(zhì)區(qū)域還可見少量炎癥細胞浸潤及纖維化形成,在48h時間點髓質(zhì)區(qū)受損最嚴重;在給予尿毒清顆粒干預(yù)的尿毒清組大鼠,腎小管上皮細胞水腫、管腔阻塞程

5、度,髓質(zhì)區(qū)腎小管結(jié)構(gòu)受損程度及間質(zhì)炎癥細胞浸潤、纖維化形成程度,均輕于同一時間點的CIN組(P<0.05)。
　　3.免疫組化與RT-PCR:對照組大鼠腎組織KIM-1、NF-κB、TNF-α蛋白及mRNA表達水平在造模前后各時間點變化不大(P>0.05);CIN組和尿毒清組KIM-1、NF-κB、TNF-α蛋白及mRNA表達水平在造模后均有所升高,且KIM-1蛋白及mRNA表達水平均在24h達高峰,NF-κB、TNF-α蛋白mR

6、NA表達水平均在48h達高峰,但在12h、24h、48h、72h及5d時間點,尿毒清組腎組織KIM-1、NF-κB及TNF-α免疫組化平均光密度、陽性率及陽性面積均顯著低于CIN組(P<0.05),腎組織KIM-1mRNA、NF-κB mRNA及TNF-αmRNA表達也較CIN組弱(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、尿毒清顆粒能減輕CIN模型大鼠的腎小管上皮細胞水腫、管腔阻塞程度,下降CIN模型大鼠的血清Scr、BUN水