癌蛋白p28GANK對肝癌前體細胞的調控作用及機制研究.pdf

1、第二軍醫(yī)大學博士學位論文癌蛋白p28GANK對肝癌前體細胞的調控作用及機制研究姓名：錢尤雯申請學位級別：博士專業(yè)：腫瘤學指導教師：王紅陽201205第二軍醫(yī)大學博士學位論文癌蛋白p28GANK特異性結合并抑制p28GANK成瘤活性。此外，癌蛋白p28GANK能與泛素蛋白連接酶MDM2相互作用，調節(jié)P53的泛素化及降解，進而抑制P53介導的細胞凋亡。臨床統(tǒng)計提示，癌蛋白p28GANK的表達水平與肝癌及食管癌患者的預后相關，但是目前該基因如

2、何促進肝癌及食管癌發(fā)生發(fā)展的作用機制仍未明了。我室于2001年在國內首次克隆了癌基因p2∥胱，并通過大量的臨床肝癌樣本的免疫組化檢測，確認其表達蛋白p28GANK可能為目前己知的具有一定肝癌細胞特異性的癌蛋白。我組前期研究發(fā)現(xiàn)干擾肝癌細胞中p28GANK的表達可明顯抑制細胞的增殖并可在體內外誘發(fā)腫瘤細胞凋亡，p28GANK直接結合NFKB／ReiA，加速NFKB出核，抑制其轉錄活性。此外，大鼠2AAF／PH模型誘導的肝卵圓細胞活化過程中

3、伴隨著p2∥胱的mRNA和蛋白表達水平均上升、Rb磷酸化降解以及CDK4／CyclinDI的活化，提示p28GANK可能在肝卵圓細胞介導的肝再生及肝卵圓細胞的細胞周期中發(fā)揮著重要作用；我室新發(fā)現(xiàn)OV6可以做為肝癌前體細胞的標志物，并研究了Wnffpcatenin信號通路在OV6陽性細胞亞群中的重要調節(jié)作用。我們觀察到OV6陽性的腫瘤性肝前體細胞中朋儼的mRNA表達升高，而Rb和p53蛋白表達下降，這些都提示p28GANK可能與正常和腫瘤

4、性肝前體細胞的活化存在某種聯(lián)系。腫瘤相關蛋白調控腫瘤前體細胞的增殖和分化可能是腫瘤干細胞調控的機制之一，但是目前尚未見到癌蛋白p28GANK調控肝癌前體細胞的相關報道，因此，探討癌蛋白p28GANK調控肝癌前體細胞活化的分子機制是本課題研究的重點，旨在加深我們對腫瘤生物學的認識，為研發(fā)新的腫瘤治療藥物和方法提供理論依據(jù)。實驗方法：1載體及病毒構建：構建過表達p28GANK慢／腺病毒載體、由RNAi介導的低表達p28GANK的慢／腺病毒載